O termo “transformação” refere-se à ingestão celular de DNA estranho. Na natureza, a transformação pode ocorrer em certos tipos de bactérias. Na biologia molecular, no entanto, a transformação é artificialmente induzida através da criação de poros nas paredes celulares bacterianas. Células bacterianas capazes de tirar DNA do ambiente são chamadas de células competentes. Células eletrocompetntes podem ser produzidas em laboratório e a transformação dessas células pode ser alcançada através da aplicação de um campo elétrico que cria poros na parede celular através do qual o DNA pode passar.
O vídeo explica o equipamento utilizado na eletroporação, como um eletroporador e cuvette eletroporação. O vídeo também passa por um procedimento passo a passo sobre como criar células eletrocompetntes e células eletroporas de interesse.
Também são mencionadas a previsão do sucesso de uma transformação de um experimento, observando a constante do tempo, bem como a importância de retirar o sal das soluções ao eletroporar.
Procedimento
A transformação bacteriana é um processo natural, no qual as bactérias ingerem DNA estranho e depois amplificam ou clonam. Em laboratório, esse processo pode ser induzido artificialmente, usando pulsos de campo elétricos de alta tensão para criar poros na membrana celular bacteriana, através da qual o DNA plasmídeo pode passar. A eletroporação refere-se a este método e o vídeo a seguir demonstrará seus princípios, procedimento passo a passo e aplicações. Antes de falar…