角膜是眼睛的透明表面，由三个不同的层组成：上皮、基质和内皮。该器官在体内具有最高的神经支配密度，主要由源自三叉神经节眼科分支的感觉纤维（Aδ 和 C 型）组成。感觉纤维以大束的形式穿透中基质中角膜的外围，这些束向外分支以覆盖表面。然后它们分叉以刺穿鲍曼膜并形成基底下丛，这很容易通过角膜中心形成的涡旋来识别。这些纤维终止于上皮外表面的游离神经末梢。它们能够转导热刺激、机械刺激和化学刺激，并释放对上皮稳态至关重要的营养因子 ^1,2。神经营养性角膜炎（NK）是一种影响角膜感觉神经支配的退行性疾病。这种罕见的疾病源于角膜敏感性的降低或丧失，导致角膜泪液分泌减少和愈合性能差³.NK 进展经历了三个明确描述的阶段，从患者出现上皮缺陷的第 1 阶段到发生基质融化和/或角膜穿孔的第 3 阶段⁴。

在临床上，这种疾病的起源可能是多种多样的。患者在眼睛受到物理损伤、手术或慢性疾病（如糖尿病）后可能会失去角膜神经支配 ^5,6。迄今为止，NK的发病机制过程仍然知之甚少，这种威胁视力的疾病的治疗选择非常有限。因此，需要更好地了解上皮缺损的特征，以更好地了解这些纤维再生背后的机制并可能促进它们。在这里，我们提出了几种在小鼠中诱导NK的角膜损伤模型。

第一种模型是带有眼毛刺的角膜上皮层的磨损。该模型主要在不同动物（如啮齿动物和鱼类）的上皮再生的背景下进行研究 ^7,8,9，^并测试促进角膜愈合的分子^10,11。从生理上讲，上皮细胞需要 2-3 天才能闭合伤口。然而，神经支配的生理模式需要四个多星期才能从擦伤中恢复^12,13。在手术过程中，眼毛刺会去除角膜的上皮层，该角膜上皮层包含基底下丛和纤维的游离神经末梢。该手术在临床上可以与光屈光性角膜切除术 （PRK） 患者进行比较，以矫正眼部屈光缺损。该过程包括去除角膜上皮，然后用激光重塑基质¹⁴.患者在此类手术后可能会出现多种副作用，例如角膜神经密度降低 2 年^，敏感性降低持续 3 个月至 1 年15。鉴于手术会引起角膜微环境的脆弱性，该模型可以帮助研究这些副作用并开发治疗方法，以促进更快的神经再支配，从而减少所讨论的副作用。

第二种模型包括用活检打孔切开角膜外围的轴突，诱导中枢神经支配的沃勒变性 ¹⁶。在临床上，这种方法可以与前板层角膜移植术进行比较，在前板层角膜移植术中，外科医生实现了角膜的部分环钻术，以去除角膜前部厚度的一部分，并用供体移植代替 ¹⁷。板层角膜移植术后，患者可能会出现许多症状，包括干眼症、角膜神经支配丧失和移植物排斥反应¹⁸。这种对角膜神经进行的轴突切开术模型可以深入了解纤维变性的机制，纤维变性发生在移植物后，然后是轴突再生。

第三种方法是用激光损伤角膜神经。通过在麻醉动物的角膜上使用多光子显微镜，由于活性氧 （ROS） 的形成，诱导位于光场中的神经变性，从而导致 DNA 损伤和细胞空化¹⁹。这种方法概括了过度暴露于自然紫外线（晒伤）引起的角膜光损伤，这也触发了 ROS 的形成，导致 DNA 损伤²⁰。患有角膜晒伤的患者会经历巨大的痛苦，因为上皮细胞的恶化剥夺了角膜纤维的四肢。

这里描述的三种方法旨在研究NK的发病机制过程和轴突再生。它们易于重复且精确。此外，它们可以快速恢复和轻松监控动物。