Primære murine BMSCs brukes ofte som en i vitro modell av mesenchymal stamceller siden sin oppdagelse i tidlig 1980-tallet¹. Faktisk opprettholde kulturer av plast-tilhenger celler tømmes fra benmargen hulrommet av lange ben kapasitet til å differensieres til osteoblasts, osteoklast, chondrocytes eller adipocytter i mange studier^{2,3, 4 , 5}. benmargen er imidlertid en unik vev består av mange ulike celle populasjoner inkludert, men ikke begrenset til, BMSCs, HSCs, endothelial, og immunsystemet cellene. Dermed kan isolasjon og kultur teknikker gi celle populasjoner med forskjellige homogenitet. Bruk av teknikker for å teste differensiering potensielle fra celler kan være utfordrende. For eksempel når du sammenligner cellene fra mus med ulike genotyper, starter med en mikset-celle befolkningen begrenser tolkningen av dataene. Derimot å oppnå homogene bestander av BMSCs og HSCs kan være teknisk vanskelig og ikke som representant for en ex vivo -modell.

I vårt laboratorium er vi primært interessert i bruken av BMSCs på grunn av deres potensial til differensieres i osteoblasts, osteoklast og adipocytter. Her presenterer vi teknikker for BMSCs og HSCs isolasjon og kultur brukes til å vurdere osteoblastogenesis eller adipogenesis i vitroog kulturer av HSCs til å skille ut osteoklast. En metode bruker en blandet befolkning beinmargen celleområde (BMCs) som inneholder BMSCs og HSCs egnet for adipogenesis, osteoblastogenesis og osteoclastogenesis (kalt Total BMCs). Denne metoden er en nærmere ex vivo representasjon av heterogenitet som er funnet blant cellene i benmargen microenvironment. En annen metoden skiller tilhenger fra ikke-tilhenger celler å kultur “renere” bestander av BMSCs og HSCs (kalt tilhenger BMSCs). Den senere tillater cellekultur eksperimenter for å starte med et mer nøyaktig antall BMSCs eller HSCs og reduserer muligheten av komplekse indirekte effekter av andre celle populasjoner som forblir i kulturen. Begge metodene har vært tidligere publisert og brukes til å håndtere forskjellige forskning spørsmål^6,7,8,9.