BMSC murine primaires est utilisées comme modèle in vitro de cellules souches mésenchymateuses depuis leur découverte dans le début des années 1980¹. En effet, les cultures de cellules adhérentes plastique vidées de la cavité de la moelle osseuse des os longs maintiennent la capacité à être se différencient en ostéoblastes, les ostéoclastes, chondrocytes ou adipocytes dans nombreuses études^{2,3, 4 , 5}. Toutefois, la moelle osseuse est un tissu unique composé de plusieurs différentes populations cellulaires y compris, mais non limité à, BMSC, CSH, les cellules endothéliales et immunitaires. Ainsi, d’isolement et des techniques de culture peuvent produire des populations de cellules avec différente homogénéité. En utilisant ces techniques pour tester la potentiel de différenciation des cellules peut être difficile. Par exemple, lorsque l’on compare les cellules des souris avec des génotypes différents, commençant par une population de cellules mixtes limite l’interprétation des données. À l’inverse, obtention des populations homogènes de BMSC et csh peut être techniquement difficile et ne peut pas être aussi représentatif d’un modèle ex vivo .

Dans notre laboratoire, nous nous intéressons principalement à l’utilisation du BMSC en raison de leur potentiel à être se différencient en ostéoblastes, les ostéoclastes et les adipocytes. Nous présentons ici les techniques d’isolement BMSC et GPX et de la culture utilisée pour évaluer l’osteoblastogenèse ou l’adipogenèse le in vitro, ainsi que des cultures de CSH se différencier en ostéoclastes. Une méthode utilise une population mixte de cellules de moelle osseuse (BMC) contenant BMSC et GPX directement adapté pour l’adipogenèse, osteoblastogenèse et osteoclastogenesis (appelé ca Total). Cette méthode est une représentation plus proche ex vivo de l’hétérogénéité trouvée parmi les cellules du microenvironnement de la moelle osseuse. Une autre méthode sépare adhérentes de cellules non adhérentes dans une tentative de culture plus « pur » des populations de BMSC et csh (appelé adhérent BMSC). La méthode plus tard autorise la culture cellulaire des expériences pour démarrer avec un nombre plus précis du BMSC ou GPX et réduit le potentiel des effets indirects complexes des autres populations de cellules qui restent dans la culture. Les deux méthodes ont été précédemment publiés et utilisés pour traiter différents recherche questions^6,7,8,9.