Primære murine BMSCs er almindeligt anvendt som en in vitro- model af mesenkymale stamceller siden deres opdagelse i den tidlige 1980s¹. Faktisk, kulturer af plast-tilhænger celler skyllet fra knoglemarven hulrummet af lange knogler opretholde kapacitet skal differentieres i osteoblaster, osteoklaster, chondrocytter eller adipocytter i mange studier^{2,3, 4 , 5}. dog knoglemarven er en unik væv består af mange forskellige cellepopulationer, herunder, men ikke begrænset til, BMSCs, HSCs, endotel og immun celler. Således, isolation og kultur teknikker kan give cellepopulationer med forskellige homogenitet. Ved hjælp af disse teknikker til at teste den potentielle differentiering fra celler kan være udfordrende. For eksempel, når man sammenligner celler fra mus med forskellige genotyper, begyndende med en blandet celle population begrænser fortolkning af data. Omvendt, at opnå homogen populationer af BMSCs og HSCs kan være teknisk vanskeligt og måske ikke som repræsentant for en ex vivo -model.

I vores laboratorium er vi primært interesseret i udnyttelsen af BMSCs på grund af deres potentiale skal differentieres i osteoblaster og osteoklaster adipocytter. Vi præsenterer her, teknikker til BMSCs og HSCs isolation og kultur bruges til at vurdere osteoblastogenesis eller adipogenesis i vitroog kulturer af HSCs til at differentiere i osteoklaster. Én metode bruger en blandet population af knoglemarv celler (BMCs) der indeholder BMSCs og HSCs direkte egnet til adipogenesis, osteoblastogenesis og osteoclastogenesis (kaldet samlede BMCs). Denne metode er en tættere ex vivo repræsentation af heterogenitet fundet blandt cellerne i knoglemarven mikromiljø. En anden metode adskiller tilhænger fra ikke-tilhænger celler i et forsøg på at kultur “renere” populationer af BMSCs og HSCs (kaldet tilhænger BMSCs). Den senere metode tillader cellekultur eksperimenter for at starte med en mere præcis antal BMSCs eller HSCs og reducerer potentiale af komplekse indirekte virkninger af andre cellepopulationer, der forbliver i kulturen. Begge metoder har været tidligere offentliggjort og bruges til at løse forskellige forskning spørgsmål^6,7,8,9.