Chez les mammifères lésion de la moelle épinière (SCI) est une maladie dévastatrice qui conduit à une perte permanente de la fonction ci-dessous le site de la lésion, car axones lésés ne se régénèrent pas dans la zone de traumatisme et se reconnecter à leurs cibles. Contrairement aux mammifères, les lamproies récupérer locomotion après une lésion complète de la moelle épinière. ¹ Fait intéressant, les lamproies ont un ensemble de 36 moelle épinière projection neurones qui sont identifiables individuellement dans l'ensemble du montage des préparations du cerveau en raison de leur grande taille ^2,3 (Figure 1) . Tous ces neurones spinaux sont en saillie par un axotomisés complète transection de la moelle épinière de haut niveau. Des études antérieures de notre groupe et d'autres ont montré que, même en présence de la récupération fonctionnelle après un traumatisme médullaire certains de ces neurones présentent une très faible capacité de régénération (ils sont considérés comme «mauvais régénérateurs»), tandis que d'autres se régénèrent généralement leur axone à travers le site de la lésion (ils sont considérés comme «grégénérateurs ood »). ^2,3 Cette caractéristique rend les lamproies un modèle vertébré intéressant d'étudier les différences d'expression génique entre le bien et le mal régénérateur neurones spinaux saillie qui à son tour conduire à des différences dans la capacité de régénération intrinsèque des neurones qui tentent de régénérer leurs axones dans le même environnement extrinsèque. ¹

En utilisant ce modèle, nous avons précédemment montré que les neurones de projection de la colonne vertébrale avec une faible capacité de régénération axonale de montrer l'expression des récepteurs de molécules de guidage comme UNC5 néogénine ^4,5 et ^6, qui assurent la médiation de l'action inhibitrice de la nétrine et RGM respectivement. En outre, en utilisant cette méthode notre groupe a également montré que seules les bonnes régénérateurs montrent une récupération de l'expression des neurofilaments après la lésion et au cours du processus de régénération. Récemment, Busch et Morgan ⁷ ont montré par immunofluorescence que les mauvaises régénérateurs montrent un increasexpression ée de synucléine après une blessure, qui a été rapporté par les auteurs sur le fait que les "mauvais" régénérateur neurones spinaux saillie meurent lentement après un sectionnement de la moelle épinière ^5,7,8 complète. Ainsi, le modèle de la lamproie d'une lésion complète de la moelle épinière a émergé comme un modèle très utile pour comprendre ce qui rend un cordon en saillie neurone spinal une «mauvaise régénérateur" après axotomie.

Pour mener nos études, nous effectuons un sectionnement de la moelle épinière protocole de chirurgie complète et une dissection postérieure du cerveau au niveau des points de temps souhaités après une blessure à effectuer wholemount hybridation in situ. Dans l'article méthodologique actuelle, nous présentons un protocole détaillé pour la bonne exécution d'une opération complète de lésions de la moelle épinière chez les lamproies larvaires, l'entretien ultérieur des animaux et la dissection du cerveau finale et la préparation du cerveau pour une wholemount hybridation in situ. Un protocole détaillé de perform la wholemount hybridation in situ dans le cerveau des lamproies larvaires a été indiqué précédemment. ⁹ En outre, ce protocole en cas de blessure de la moelle épinière et le cerveau dissection peut être également utilisé pour traiter ensuite les cerveaux pour l'immunohistochimie ou d'autres méthodes histologiques.