Utilisation d'<em> In vivo</em> Imagerie à suivre la progression de cytomégalovirus souris une infection expérimentale chez les prématurés

Cytomégalovirus humain (HCMV/HHV-5) est un membre de la famille β-herpesvirus. HCMV est très répandue, pathogène opportuniste qui est généralement acquise en début de vie comme une infection asymptomatique ^1. Comme tous les virus de l'herpès, HCMV persiste pendant toute la vie de l'hôte dont le système immunitaire contrôle étroitement la réplication virale. Les épisodes de réactivation virale surviennent surtout chez les personnes immunodéprimées comme les patients transplantés recevant des médicaments pour prévenir le rejet du greffon ^2. Chez les adultes, HCMV a également été liée à glioblastomes ^3. En outre, HCMV est un agent pathogène important pour les nouveau-nés avec une immunité immature ^4-6. La primo-infection dans le développement du fœtus ou nouveau-né peut avoir de graves conséquences. HCMV infection est la cause infectieuse la plus fréquente des malformations congénitales et des troubles de l'enfance dans les pays développés. On estime que l'incidence de l'infection néonatale HCMV affecte 0,5-1% of toutes les naissances vivantes dont 5-10% vont souffrir de symptômes sévères tels que la microcéphalie ou hypoplasie cérébelleuse. En outre, 10% des nourrissons infectés par une infection virale subclinique se développer plus tard des séquelles entraînant un retard mental, perte, défauts visuels ou de la saisie et de l'épilepsie ^7,8 auditive.

Contrairement aux autres herpèsvirus humains tels que l'herpès simplex 1 (HSV-1/HHV-1) qui peut être inoculé à des souris par différentes voies d'injection ^9, la réplication du cytomégalovirus est spécifique à l'espèce. Cette fonctionnalité a gravement entravé les enquêtes de HCMV pathogenèse qui sont effectuées dans différents modèles animaux (souris, rat, cochon Guinée, le singe rhésus) et leurs CMV spécifiques de l'hôte d'origine respectifs. Tous les VMC présentent des similitudes importantes dans la taille du génome et de l'organisation, le tropisme tissulaire et la régulation de l'expression des gènes. Ils induisent également des pathologies similaires dans leur hôte respectif. Malgré la diversité génomique êtreentre HCMV et souris cytomégalovirus (MCMV) (50% des ORF présents dans le virus humain sont identifiés dans le CMV murin), le modèle de la souris s'est récemment révélé être avantageux, surtout parce que les souches mutantes peuvent être testés pour leur capacité à contrôler virale la réplication in vivo. Cela a conduit à un crible génétique qui a permis d'estimer le nombre de gènes de souris exprimés au stade adulte qui composent le "résistome" à ce virus ^10. Au total, cela indique que les souris infectées par MCMV représentent un modèle intéressant pour l'étude des interactions hôte-virus chez les adultes. L'exploration de l'infection congénitale à CMV est plus complexe parce que les différences dans l'organisation de la couche placentaire entre l'homme et la souris nuisent à la transmission mère-fœtus de l'infection virale chez la souris. Récemment, l'injection directe de MCMV dans le placenta à jour 12.5 de gestation a permis infection du cerveau de souris nouveau-nés qui ont conduit à la dépréciation audience ^11. Cependant, la plupart investigations utilisent désormais injection intrapéritonéale de 4-20 hr-nés âgés de fournir dissémination virale systémique pouvant conduire à une infection hématogène du cerveau, un modèle qui est plus pertinent que celui d'une injection intracrânienne. Ce protocole a fourni d'importantes informations sur la pathogenèse CMV et plus particulièrement, il a été démontré que l'infection par MCMV de nouveau-nés résultats de la réplication virale dans les cellules neuronales et gliales situées dans les foyers inflammatoires qui sont infiltrés par des cellules mononucléaires comme les macrophages ^12. Ce rapport décrit également la morphogénèse altérée du cervelet accompagné d'une diminution granulaire prolifération des neurones et de la migration et de l'induction de plusieurs gènes d'interféron-stimulés. Le rôle essentiel des cellules T CD8 + pour le contrôle de MCMV dans le système nerveux central a également été rapporté par le même groupe ^13. Un aspect important à considérer lors de l'analyse de l'effet pathologique d'un microbe est la dynamique de l'infecterd'ions. Dans le cas de MCMV, il est particulièrement important d'explorer et de quantifier la progression de la diffusion du virus dans le cerveau en développement afin de comprendre et d'anticiper l'ampleur des futurs blessures neurobiologiques. Traditionnellement, la quantification de la progression d'une infection nécessite le sacrifice régulier des animaux infectés de titrer l'agent pathogène dans les tissus, tels que le cerveau, qui sont autrement inaccessibles. Ce type de protocole est maintenant contestée par l'amélioration nécessaire du bien-être animal et les 3R (Réduire, Refine, Replace) principes ^14. L'utilisation des technologies d'imagerie in vivo peut permettre une réduction drastique du nombre d'animaux qui sont nécessaires dans des expériences d'infection in vivo. Ici, nous présentons et décrivons une analyse temps-courant de la diffusion du virus dans le cerveau lors de intrapéritonéale MCMV-Luc injection pour les nouveau-nés de souris. En utilisant les mêmes animaux, nous avons suivi et surveillé in vivo les sites d'intense viréplication ral au cours d'une période de 2 semaines.