Gebruik van<em> In vivo</em> Imaging aan de progressie van de Experimentele Mouse Cytomegalovirusinfectie in Pasgeborenen Monitor

Human Cytomegalovirus (HCMV/HHV-5) is een lid van de β-herpesvirusfamilie. HCMV is een veel voorkomende, opportunistische pathogeen die meestal tijdens het vroege leven wordt verkregen als een asymptomatische infectie ^1. Net als alle herpesvirussen, HCMV blijft gedurende de gehele levensduur van de gastheer bij wie het immuunsysteem strak regelt virale replicatie. Afleveringen van virale reactivering vooral optreden bij immuungecompromitteerde personen, zoals transplantatie patiënten die medicijnen om afstoting te voorkomen ^2. Bij volwassenen is HCMV ook verbonden met glioblastoma ^3. Daarnaast HCMV is een prominente pathogeen voor pasgeborenen met onvolwassen immuniteit ^4-6. Primaire infectie in de zich ontwikkelende foetus of pasgeboren kind kan ernstige gevolgen hebben. HCMV infectie is de meest voorkomende infectieuze oorzaak van aangeboren afwijkingen en stoornissen bij kinderen in ontwikkelde landen. Er wordt geschat dat de incidentie van neonatale HCMV infectie treft 0,5-1% of alle levendgeborenen waaronder 5-10% zal lijden aan ernstige symptomen zoals microcefalie of cerebellaire hypoplasie. Daarnaast zal 10% van de geïnfecteerde zuigelingen met subklinische virale infectie ontwikkelen later restverschijnselen leiden tot mentale retardatie, gehoorverlies, visuele gebreken of inbeslagneming en epilepsie ^7,8.

In tegenstelling tot andere humane herpesvirussen zoals Herpes Simplex 1 (HSV-1/HHV-1) die kan worden geïnoculeerd in muizen via verschillende routes van injectie ^9, cytomegalovirus replicatie soortspecifiek. Deze functie is ernstig belemmerd onderzoeken HCMV pathogenese die worden uitgevoerd in verschillende diermodellen (muis, rat, cavia, rhesus aap) en hun werkelijke gastheerspecifiek CMVs. Alle CMVs vertonen belangrijke overeenkomsten in het genoom omvang en organisatie, weefseltropisme en regulatie van genexpressie. Ze veroorzaken ook gelijkaardige pathologieën in hun respectievelijke gastheer. Ondanks genomische diversiteittween HCMV cytomegalovirus en muis (MCMV) (50% van de ORF's aanwezig in het humane virus zijn geïdentificeerd in het muizen CMV), heeft het muismodel onlangs bleek gunstig, vooral omdat mutante stammen kunnen worden getest op hun vermogen om controle virale replicatie in vivo. Dit heeft geleid tot een genetische screen, die een schatting van het aantal muisgenen expressie in het volwassen stadium waarin de "resistoom" om dit virus ¹⁰ samen ingeschakeld. In totaal betekent dit dat MCMV-geïnfecteerde muizen vormen een aantrekkelijk model voor de studie van gastheer-virus interacties bij volwassenen. De exploratie van congenitale CMV-infectie is complexer, omdat de verschillen in de placenta layer organisatie tussen menselijke en muizen aantasting van de moeder-aan-foetus overdracht van de virale infectie in muizen. Onlangs, heeft directe injectie van MCMV in de placenta op dag 12.5 van de dracht hersenen infectie van muizen pasgeborenen die leidde tot slechthorendheid ¹¹ ingeschakeld. De meeste investigations gebruiken nu intraperitoneale injectie van 4-20 hr-oude neonaten tot systemische virale verspreiding mogelijk leidt tot hematogene hersenen infectie, een model dat is meer relevant dan die van een intracraniële injectie geven. Dit protocol belangrijke inzichten in de pathogenese CMV en meer in het bijzonder werd aangetoond dat MCMV infectie van pasgeborenen resulteert in virale replicatie in neuronen en gliale cellen in inflammatoire foci die zijn geïnfiltreerd met mononucleaire cellen zoals macrofagen ^12. Dit rapport beschreef ook veranderd morfogenese van het cerebellum gepaard met een verminderde korrelige neuron proliferatie en migratie en de inductie van meerdere interferon gestimuleerde genen. De essentiële rol van CD8 + T-cellen voor de bestrijding van MCMV in het centrale zenuwstelsel werd ook door dezelfde groep ^13. Een belangrijk aspect om te overwegen bij het analyseren van de pathologische gevolgen van een microbe is de dynamiek van het infecterenion. Bij MCMV, is het bijzonder belangrijk te onderzoeken en kwantificeren van de progressie van virale verspreiding in de ontwikkelende hersenen om te begrijpen en anticiperen op de omvang van de toekomstige neurobiologische verwondingen. Traditioneel is de kwantificering van de progressie van een infectie vereist regelmatig offer van besmette dieren het pathogeen in weefsels zoals de hersenen, die anders ontoegankelijk titreren. Dit type protocol wordt nu uitgedaagd door noodzakelijke verbetering van het dierenwelzijn en de 3 V's (vermindering, verfijning, Vervangen) principes ^14. Met behulp van in vivo imaging technologieën kan toestaan ​​dat een drastische vermindering van het aantal dieren die nodig zijn in vivo infectie-experimenten. Hier melden wij en beschrijven een tijdsverloop analyse van virale verspreiding in de hersenen na intraperitoneale MCMV-Luc injectie om de muis pasgeborenen. Met dezelfde dieren we gevolgd en gecontroleerd in vivo het plaatsen van intense viral replicatie gedurende een periode van 2 weken.