גישה רבת פנים לחקר שינויים הפונקציונליים למעגלי היפוקמפוס מוסברת. טכניקות אלקטרו מתוארות יחד עם פרוטוקול פציעה, בדיקה התנהגותית ושיטת נתיחה אזורית. שילוב של טכניקות אלה יכול להיות מיושם באופן דומה לאזורים אחרים במוח ושאלות מדעיות.
פגיעה מוחית טראומטית (TBI) פוגעת יותר מ -1.7 מיליון בני אדם בארצות הברית בכל שנה ואפילו TBI קל עלול להוביל לליקויים נוירולוגיים מתמשכים 1. שני סימפטומים חודרניים וההשבתה שחוו ניצולי TBI, גירעונות זיכרון וירידה בסף תפיסה, הם חשבו להיות מתווכים על ידי תפקוד TBI-Induced היפוקמפוס 2,3. כדי להמחיש עד כמה שונה פונקצית המעגל היפוקמפוס משפיעה לרעה על התנהגות לאחר TBI בעכברים, אנחנו מעסיקים פגיעה רוחבית נוזל כלי קשה, מודל נפוץ חיה של TBI המשחזר תכונות רבות של אדם TBI כולל אובדן הנוירונים תא, דבק, והפרעות יוניות – 4 6.
כאן אנו מדגימים שיטת קומבינטורית לחקירת תפקוד היפוקמפוס TBI מושרה. הגישה שלנו משלבת טכניקות גופיים פיסיולוגיות רבות יחד עם התנהגות בעלי חיים וניתוח ביוכימי, כדי לנתחשינויים שלאחר TBI ביפוקמפוס. אנחנו מתחילים בפרדיגמה הניסויית פציעה יחד עם ניתוח התנהגותי להעריך מוגבלות קוגניטיבית בעקבות TBI. בשלב בא, המכילים שלוש טכניקות שונות גופיים הקלטה: הקלטת פוטנציאל תחום תאית, דימו את תיקון clamping-כל תאים, ורישום צבע רגיש מתח. לבסוף, אנחנו מדגימים את שיטה לביתור אזורי משנה של ההיפוקמפוס, שיכול להיות שימושית לניתוח מפורט של שינויי neurochemical וחילוף חומרים שלאחר TBI אזורי.
שיטות אלה היו בשימוש כדי לבחון את השינויים במעגלים ביפוקמפוס לאחר TBI ולחקור את השינויים המנוגדים בתפקוד מעגל רשת המתרחשים ברכס המשונן וCA1 אזורי המשנה של ההיפוקמפוס (ראה תרשים 1). היכולת לנתח את השינויים שלאחר TBI בכל אזור משנה היא חיונית להבנת המנגנונים התורמים להתנהגות TBI מושרה וקוגניטיבי דeficits.
המערכת רבת הפנים המתוארים כאן מאפשרת לחוקרים לדחוף אפיון העבר של הפנומנולוגיה הנגרם על ידי מצב של מחלה (במקרה זה TBI) ולקבוע את המנגנונים האחראים לפתולוגיה הנצפית קשורה עם TBI.
כל טכניקה שתוארה לעיל תורמת להבנה הטובה יותר של המנגנון הבסיסי שגורם לגרעון התנהגותית הנצפה. על ידי שילוב של המידע הייחודי שנרכש מכל שיטה שאנחנו יכולים לבחון את המנגנונים הביולוגיים עם יותר דיוק.
fEPSPs מדידה שימושית לכימות היעילו?…
The authors have nothing to disclose.
המחברים מבקשים להודות לאליוט ורז'ואה לסיוע הטכני שלו. עבודה זו מומנה על ידי המכונים הלאומיים לבריאות מענקי R01HD059288 וR01NS069629.
Name of the equipment | Company | Catalogue number | Comments (optional) |
Axopatch 200B amplifier | Molecular Devices | AXOPATCH 200B | Patch-clamp rig |
Digidata 1322A digitizer | Molecular Devices | Patch-clamp rig | |
MP-225 micromanipulator | Sutter | MP-225 | Patch-clamp rig |
DMLFSA microscope | Leica | Patch-clamp rig | |
Multiclamp 700B amplifier | Molecular Devices | MULTICLAMP 700B | Multipurpose (field) rig |
Digidata 1440 digitizer | Molecular Devices | Multipurpos (field) rig | |
MPC-200 micromanipulator | Sutter | MPC-200 | Multipurpose (field) rig |
BX51WI microscope | Olympus | BX51WI | Multipurpose (field) rig |
Axoclamp 900A amplifier | Molecular Devices | AXOCLAMP 900A | VSD rig |
Digidata 1322 digitizer | Molecular Devices | VSD rig | |
Redshirt CCD-SMQ camera | Redshirt | NCS01 | VSD rig |
VT 1200S Vibratome | Leica | 14048142066 | |
P-30 Electrode puller | Sutter | P-30/P | |
cOmplete protease inhibitor | Roche | 11697498001 |