Caratterizzazione elettrofisiologica delle risposte neuronali è importante per comprendere le funzioni cerebrali e per guidare il posizionamento dei coloranti per via tracing. Tuttavia, molti studi sono effettuati in animali anestetizzati. Per capire la funzione del cervello senza anestesia, abbiamo sviluppato un metodo per registrare le proprietà di risposta dei neuroni e iniettare coloranti nel topo sveglio.
È ben noto che l'anestesia altera proprietà di risposta neurali in diverse regioni del cervello. 13. Nel sistema uditivo, le proprietà fondamentali di risposta dei neuroni del tronco encefalico compresa una soglia, la specificità frequenza e bande laterali inibitorie sono alterate in modo significativo sotto anestesia 1-2. Queste osservazioni richiesto fisiologi a cercare modi per registrare da singoli neuroni senza gli effetti contaminanti di anestesia. Un risultato era una preparazione decerebrate, dove il tronco è stato completamente recisi a livello del mesencefalo 4. Gli svantaggi di questa preparazione sono un formidabile intervento chirurgico, l'eliminazione di scendere proiezioni del prosencefalo, e l'incapacità di utilizzare la stimolazione sensoriale per esaminare le strutture al di sopra del mesencefalo. Una strategia diversa è stata quella di impiantare cronicamente schiere di elettrodi per registrare da singoli neuroni e cluster multipla mentre l'animale è sveglio e / o si comporta 5,6 </sup>. Queste tecniche, tuttavia, non sono compatibili con l'iniezione di coloranti traccianti dopo la prima elettrofisiologico che caratterizza una struttura cerebrale. Per evitare di alterare le proprietà di risposta neurale con anestetici durante la registrazione di proprietà di risposta elettrofisiologiche da singoli neuroni, abbiamo adattato una tecnica poggiatesta a lungo utilizzato nei pipistrelli 7-9 al mouse 10-12. Utilizzando questo metodo, siamo in grado di effettuare registrazioni elettrofisiologiche per diversi giorni nel topo non anestetizzato. Al termine delle sessioni di registrazione, si può iniettare un colorante per ricostruire posizioni elettrodi e siti di registrazione o iniettare un tracciante in modo che i percorsi da e verso i loci di registrazione può essere determinato. Questo metodo permette di ben isolate registrazioni singolo neurone per più giorni, senza l'uso degli anestetici.
Il vantaggio del capo-post sistema di ritenuta per esperimenti elettrofisiologici e neuroanatomici in mouse è che gli esperimenti possono essere condotti con sveglio non anestetizzati, topi, eliminando una potenziale contaminazione risposta dovuta ai farmaci anestetici. Inoltre, l'allestimento può essere utilizzato per più giorni per consentire l'uso animale più efficiente.
La maggior parte dei componenti per la testa-post sono disponibili off-the-shelf. Soltanto il capo-post ed …
The authors have nothing to disclose.
Supportato da NSF concessione 0920060, NIH concessione DC004395, NHMRC concessione 1009482, NSW Office of Science and Medical Research, e il Passe Garnett e Rodney Williams Memorial Foundation.
Name | Company | Catalogue number | Comments |
Etch gel for cleaning skull prior to dental cement | Henry Schein | 101-5396 | 12/pk with 1.2 mL syringes |
Primer for dental cement | Kerr Optibond | 25881 | 8 mL bottle |
Adhesive for dental cement | Kerr Optibond | 25882 | 8 mL bottle |
Applicators for dental cement | Kerr Optibond | 24680 | 200/pk |
Dental Cement | Charisma, Heraeus Kulzer | 66000085 | 4gm Syringe Refill |
Tungsten Rod (Ground Pin) | A-M Systems | 717200 | 0.010″ diameter |
Economy UV Curing Light | Henry Schein | CU-80 | |
Head-post | Built in-house | ||
Mounting bar | Built in-house | ||
Mounting block | Built in-house | ||
Stereotaxic Frame | David Kopf Instruments | 902 | |
Mouse and Neonatal Rat Adaptor | Stoelting | 51625 | |
Deltaphase Isothermal Pad | Braintree Scientific, Inc. | 39DP |