我们用膜片钳技术来衡量GABA激活单通道电流(GABAA受体通道,GABAA受体)和他们在神经元产生的突触和补品电流。激活的途径在健康和疾病的神经元的兴奋性降低<sup> 1,2,3,4</sup>。
GABA的一个渠道是在目前所有的神经元都位于突触和突触外,它们产生阶段性和补品的电流,分别为4,5,6,7的 GABA A通道是一个五聚体的GABA门控的氯通道。通道亚单位被分成8个家庭(α1- 6,β1- 3,γ1- 3,δ,ε,θ,π和ρ)。两个的阿尔法,两个贝塔和一个3路亚基形成功能通道 8 。通过结合分型的具体GABA激活单通道与包括所有人群中的神经元的GABA A通道的研究分子研究成为可能,以了解抑制神经元的基本机制,以及它是如何调制药理代理。
我们利用膜片钳技术,9,10,以研究在海马脑片活着神经元的GABA A通道的功能特性,并记录单通道和全细胞电流。我们进一步研究如何GABA的浓度不同,其他药物和内和外的因素影响的渠道。如需详细的理论和实践的膜片钳方法的描述,请参阅单声道录音编辑Sakman由B和E内尔10。
全细胞电流的代表乐团的活动通道,在细胞内产生的电流。具体的药理学和氯化物的GABAA渠道的渗透性,使得它可以找出与这些渠道相关的电流。短暂性突触通道激活和活化突触外渠道的滋补允许GABAA受体在神经元表达的渠道,这两个种群之间容易分化。然而,只有单声道录音,可以研究通道分子的动力学性质,产生的补药电流。 100微秒内激活突触的渠道不同,进补的GABAA通道被激活GABA是适用于 4,7,15,16,17,18的时间延迟在分钟不等。这在许多通道属性的渠道,结果延迟激活不能使用全细胞记录研究。在单通道的水平,GABAA渠道的不同亚群的基础上,不同的功能和药理特性,可以识别。因此,采取什么不同的膜片钳配置所提供的优势,它可以详细研究的分子的功能和GABA激活通道在神经元产生的滋补和突触电流的药理学。
The authors have nothing to disclose.
这项工作是由瑞典研究理事会,瑞典乌普萨拉大学和弗雷德里克和英格丽Thurings基金会。钧从EXODIAB和瑞典语Sällskapet为Medicinsk Forskning举行了博士后。我们感谢李敬技术援助。
Several patch-clamp hardware and software systems are available and they all operate using the same basic principles. In our laboratory we use the Axoclamp amplifiers and the PClamp software (Molecular Devices, USA) to record and analyze our experiments. Another popular brand is HEKA amplifiers and software (HEKA Elektronik , Germany)
Microforge: Narishige MF-830 (Japan); Vibrotome: e.g. Leica VT1200S (Germany) or Campden Instruments vibrotome (UK); Microscope: Nikon Eclipse E600FN; Water bath; Micromanipulators: custom made and Narishige micromanipulators (Japan); Puller: DMZ-universal (Germany) or Narishige PC-10 (Japan). Electrode glass: GC150F-15 (Harvard Apparatus, UK).