نستخدم تقنية التصحيح ، المشبك لقياس GABA تنشيط المفرد قناة التيارات (GABAA القنوات ، المستقبلات GABAA) والتيارات متشابك ومنشط التي تولدها في الخلايا العصبية. تفعيل قنوات إنقاص استثارة الخلايا العصبية في الصحة والمرض<sup> 1،2،3،4</sup>.
وGABA A قنوات موجودة في جميع الخلايا العصبية وتوجد في كل من نقاط الاشتباك العصبي وخارج نقاط الاشتباك العصبي ، حيث أنها تولد تيارات طوري ومنشط ، على التوالي 4،5،6،7 A GABA والقناة هي القناة pentameric كلوريد GABA بوابات. يتم تجميع مفارز قناة إلى 8 أسرة (α1 – 6 ، β1 – 3 ، γ1 – 3 ، δ ، ε ، θ ، وπ ρ). alphas اثنين ، الجيدات مرتين والثالثة 3 الوحيدات شكل القناة وظيفية 8. من خلال الجمع بين الدراسات الفرعية نوع محدد الجزيئات على قناة واحدة مع GABA تنشيط الدراسات بما في ذلك جميع سكان GABA A قنوات في الخلايا العصبية يصبح من الممكن فهم الآلية الأساسية لتثبيط الخلايا العصبية وكيف هو منظم من قبل وكلاء الدوائية.
نستخدم تقنية التصحيح ، المشبك 9،10 لدراسة الخصائص الفنية للقنوات وغابا في الخلايا العصبية على قيد الحياة في شرائح الدماغ الحصين وتسجيل قناة واحدة والتيارات خلية كاملة. علينا مواصلة دراسة كيفية تأثر قنوات مختلفة من تركيزات GABA ، والمخدرات ، وعوامل أخرى داخل وخارج الخلية. وصف تفصيلي للالنظري والعملي للطريقة التصحيح ، يرجى الاطلاع على المشبك واحدة القناة تسجيلات تاليف Sakman B و E Neher 10.
التيار خلية كاملة تمثل مجموعة متكاملة من التيارات التي تم إنشاؤها بواسطة القنوات النشطة في الخلية. وعلم الصيدلة والنفاذية كلوريد محددة من القنوات GABAA يجعل من الممكن تحديد التيارات المرتبطة بهذه القنوات. طبيعة عابرة لتفعيل قنوات متشابك وتنشيط منشط للقنوات extrasynaptic يسمح السهل التفريق بين هؤلاء السكان اثنين من قنوات GABAA أعرب في الخلايا العصبية. ومع ذلك ، لا يمكن إلا على قناة واحدة مع تسجيلات دراسة واحدة من الخصائص الحركية للجزيئات القناة التي تولد تيارات منشط. على عكس القنوات التي تنشط داخل متشابك 100 ميكرو ثانية ، يتم تنشيط قنوات GABAA منشط مع الكمون في نطاق دقائق من الوقت يتم تطبيق 4،7،15،16،17،18 GABA. لا يمكن تأجيل تفعيل هذه النتائج في تلك القنوات قناة خصائص كثيرة يمكن دراستها باستخدام خلية كاملة التسجيلات. ويمكن في مستوى واحد قناة يتم التعرف على مختلف المجموعات الفرعية من السكان من القنوات GABAA على أساس اختلاف الخصائص الفنية والدوائية. وهكذا ، عن طريق اتخاذ ما ميزة التصحيح المختلفة ، المشبك تكوينات لهذا العرض ، فمن الممكن للدراسة في التفاصيل الدالة الجزيئية وعلم الصيدلة من القنوات التي تنشط GABA التي تولد تيارات منشط ومتشابك في الخلايا العصبية.
The authors have nothing to disclose.
وقد تم تمويل هذا العمل من قبل مجلس البحوث السويدية ، وجامعة أوبسالا فريدريك وانغريد مؤسسة Thurings. عقدت ZJ زمالة ما بعد الدكتوراه من EXODIAB وSvenska Sällskapet لForskning Medicinsk. نشكر فرانك لي للحصول على المساعدة التقنية.
Several patch-clamp hardware and software systems are available and they all operate using the same basic principles. In our laboratory we use the Axoclamp amplifiers and the PClamp software (Molecular Devices, USA) to record and analyze our experiments. Another popular brand is HEKA amplifiers and software (HEKA Elektronik , Germany)
Microforge: Narishige MF-830 (Japan); Vibrotome: e.g. Leica VT1200S (Germany) or Campden Instruments vibrotome (UK); Microscope: Nikon Eclipse E600FN; Water bath; Micromanipulators: custom made and Narishige micromanipulators (Japan); Puller: DMZ-universal (Germany) or Narishige PC-10 (Japan). Electrode glass: GC150F-15 (Harvard Apparatus, UK).