توضح هذه المقالة أسلوب التحفيز الكهربية لعزل المادة الكيميائية إلى خارج الخلية عبر sensilla الفردية ، وتسجيلات اخبارية تحت الزيوت المعدنية.
وصفنا لتعديل القائمة 1،2 تقنية معلومات سرية عن التحقيق في تسجيل electrophysiologically قصيرة ، مثل الربط بين 3،4 sensilla الحسية. على السطح البطني منتصف كل العقارب هما الزوائد دعا pectines التي تحتوي على حقول كثيفة من mechano وحسي كيميائي ربط sensilla 5،6. طريقة واحدة لتقييم هذه chemoresponsiveness sensilla يستخدم التنغستن القطب الكهربائي خارج الخلية لتسجيل النشاط العصبي داخل sensillum كما هو إدخال الرائحة المتطايرة إلى الحقل 5،7 الحسية. القيود المفروضة على هذه الطريقة بطيئة وتشمل جمع البيانات وغير المنضبط لإدخال منبه ، والعزل من وربط الحقل. للتغلب على هذه القيود ، قمنا بتطوير جديد لتسجيل غيض أسلوب يستخدم اقطبي الزيوت المعدنية وسيلة يمكن من خلالها توصيل المياه المستندة إلى tastants sensilla ربط 8،9 فرد. لقد طبقنا بنجاح هذا الأسلوب في الحصول على chemoresponses sensillar لحامض الستريك ، والإيثانول ، والملح. نحن هنا وصف بروتوكول التجريبية لهذه الدراسة 9. نعتقد أن هذا الأسلوب الجديد قد يكون مفيدا لدراسة خصائص استجابة النظم الأخرى حسي كيميائي المفصلية ، بما فيها تلك الحشرات 10 و 11 و 12 القشريات.
بروتوكول أعلاه توضح كيفية إعداد والمراعي الصحراوية العقرب (Paruroctonus utahensis) لدراسة الكهربية. على وجه التحديد ، وتبين لنا كيفية بناء غرفة للرقابة خارج الخلية تسجيلات غيض من الخلايا العصبية حسي كيميائي تحت pectinal النفط. لأن النفط والماء لا يختلطان ، فمن الممكن لعزل التحفيز الكيميائي (مع المياه القائمة على المنشطات) لsensilla واحد. وينبغي التشديد على أنه P. utahensis ، هو حيوان صغير نسبيا (≈ 2،5-5 سم) وتطبيق هذا البروتوكول على الحيوانات الكبيرة الحجم قد يتطلب تعديلات كثيرة ، مثل حجم منصة الحيوان ، الغرفة ، وكمية من النفط التطبيقية. نوصي إجراء دراسات تجريبية لاختبار الحد الأدنى من النفط اللازم لأسلوب التسليم المراقب المنشطات الكيميائية المستندة إلى الماء.
وعلاوة على ذلك ، وجدنا أي تأثير النفط على النشاط الأساسي العصبية داخل sensilla pectinal 8. وينبغي تأكيد هذا نموذج لأنظمة أخرى كذلك ، وذلك قبل تقييم chemoresponsiveness.
ويمكن استخدام هذا الأسلوب بالاقتران مع أسلوب آخر لاختبار آثار التفاعل بين chemoresponse sensilla في الميدان الحسي. على سبيل المثال ، فمن الممكن لتسجيل معلومات سرية (في إطار النفط) من واحد ونحن sensillum قاعدة قياسية (عبر التنغستن القطب) من sensillum المجاورة 9. ويمكن استخدام مثل هذا التكوين تسجيل لتقييم ما إذا كانت أو لم تحفيز كيميائيا one sensillum يؤثر على النشاط العصبي للقاعدة sensillum المسجلة. حتى الآن لم تختبر واحدة هذا لالعقرب pectinal sensilla ، ويبقى السؤال مفتوحا لأنظمة حسي كيميائي الأخرى كذلك.
لتلخيص ، ونحن نفكر في طريقة لتسجيل معلومات سرية تحت السلف النفط في نطاق التحقيقات الكهربية العصبية الى أساس من الذوق المفصلية. في هذا المخطوط ، ونحن نقدم لإعداد بروتوكول الحيوانات لهذا الأسلوب ، ونأمل أن توفر أساسا متينا لمزيد من الدراسة للنظم العصبي المحيطي الحسية.
The authors have nothing to disclose.
نشكر صندوق الحياة ، جامعة أوكلاهوما الجامعية برنامج الفرص البحثية ، وقسم علم الحيوان للحصول على تمويل هذا العمل. كما نشكر الدكتور Hoefnagels مارييل للمساعدة التحرير.
Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
---|---|---|---|---|
Lift-N-Press tab | Ted Pella, Inc. | 16082 | Doubled-sided adhesive | |
MicroFil | World Precision Instruments, Inc. | MF34G | Micropipette filler | |
Standard Glass Capillaries | World Precision Instruments, Inc. | 1B100F-6 | Glass pipettes | |
Microelectrode Holder | World Precision Instruments, Inc. | MEH3SBW10 |