Fissazione dell'etanolo e colorazione DAPI: un metodo per visualizzare il DNA in C. elegans
Published: April 30, 2023
Abstract
Fonte: Clarke, E. K., et al. J. Vis. Exp. (2018).
Qui descriviamo una tecnica usata per visualizzare il DNA genomico in nematodi fissi e intatti. Il video include un protocollo di esempio per contare la cromatina negli ovociti C. elegans non fecondati.
Protocol
Questo protocollo è un estratto da Clarke et al, Manipolazione di Ploidy in Caenorhabditis elegans, J. Vis. Exp. I ceppi tetraploidi possono essere convalidati contando il numero di cromosomi nei loro ovociti non fecondati. La microscopia fluorescente può essere utilizzata per lo schermo per il numero di coppie cromosomiche in ovociti diploidi non fecondati (prima delle …
Materials
| Dissecting Microscope | Motic Microscopy | SMZ171 | |
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Staining | |||
| Hoechst 33258, Pentahydrate | Biotium | 40045 | |
| DAPI | Biotium | 40011 | |
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Ethanol Fixation | |||
| Ethanol, Pure, 190 Proof (95%), USP | Koptec, VWR | 89125-166 | |
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| M9 Buffer | |||
| Sodium chloride, Biotechnology Grade | VWR | 97061-278 | |
| Potassium phosphate, Monobasic Anhydrous Grade | VWR | 97062-346 | |
| Sodium phosphate, monobasic dihydrate | Fisher Scientific | AC271750025 |
Citar este artigo
Ethanol Fixation and DAPI Staining: A Method to Visualize DNA in C. elegans. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20136, doi: (2023).