Dieses Video beschreibt eine Methode zur Dissektierung von Gonaden aus erwachsenen C. elegans hermaphrodites, was zu Geweben führt, die für Immunostaining und fluoreszierende Bildgebung geeignet sind.
Protocol
Dieses Protokoll ist ein Auszug aus Gervaise und Arur, Räumliche und zeitliche Analyse von Active ERK in der C. elegans Germline. J. Vis. (2016). 1. Dissektion von erwachsenen Würmern für die Beschaffung von Gonaden Wählen Sie 100 – 150 WT (N2) oder den gewünschten Genotyp von Würmern in der gewünschten und spezifischen Entwi…
Materials
Flat bottom glass watch dish
Agar Scientific
AGL4161
We use glass because dissected gonads often stick to plastic
25 G needles
BD PrecisionGlide
305122
Syringes (could be 1 or 5 mL)
BD Syringes
1 mL: BD 309659
Microscope slides (25 x 75 x 1.0 mm)
Fisherbrand
12-550-343
Clinical bench top centrifuge
*M9 solution
Levamisole
Sigma
L9756
*M9 Buffer Recipe
3 g KH2PO4, 6 g Na2HPO4, 5 g NaCl, 1 mL 1 M MgSO4, H2O to 1 L.