Bu videoda, yetişkin C. elegans hermafroditlerinden gonadları parçalamak için bir yöntem açıklanmaktadır, bu da immünostaining ve floresan görüntüleme için uygun dokularla sonuçlanır.
Protocol
Bu protokol, C. elegans Germline’daki Aktif ERK’nin Gervaise ve Arur, Mekansal ve Zamansal Analizi’nden bir alıntıdır. J. Vis. Exp. (2016). 1. Gonad Elde Etmek İçin Yetişkin Solucanların Diseksiyonu 1,5 mL mikrosantrifüj tüpünde 100 μL M9 tamponunda istenen ve spesifik gelişim aşamasında (L1, L2, L3, L4, yetişkin <em…
Materials
Flat bottom glass watch dish
Agar Scientific
AGL4161
We use glass because dissected gonads often stick to plastic
25 G needles
BD PrecisionGlide
305122
Syringes (could be 1 or 5 mL)
BD Syringes
1 mL: BD 309659
Microscope slides (25 x 75 x 1.0 mm)
Fisherbrand
12-550-343
Clinical bench top centrifuge
*M9 solution
Levamisole
Sigma
L9756
*M9 Buffer Recipe
3 g KH2PO4, 6 g Na2HPO4, 5 g NaCl, 1 mL 1 M MgSO4, H2O to 1 L.