Drosophila ( Drosophila ) Dissection des glandes accessoires mâles : une méthode pour isoler les cellules secondaires
Published: April 30, 2023
Abstract
Source : Immarigeon, C., et autres Protocole facs-basé pour isoler l’ARN des cellules secondaires des glandes accessoires mâles de Drosophila. J. Vis. Exp. (2019).
Cette vidéo décrit la dissection des glandes accessoires des mouches mâles et montre un exemple dans lequel la glande isolée sera dissociée en une seule suspension cellulaire.
Protocol
Ce protocole est un extrait d’Immarigeon et coll.,A FACS-based Protocol to Isolate RNA from the Secondary Cells of Drosophila Male Accessory Glands, J. Vis. Exp. (2019). 1. Solutions et préparation des matériaux Préparez les solutions suivantes. Préparer le sérum complété moyen (SSM) : Le milieu de Drosophila de Schneider complété par un sérum bovin fœtal inactivé à 10 % de chaleur et 1 % de pénicilline-s…
Materials
| Binocular microscope for dissection | |||
| Binocular with light source for GFP | |||
| Bunsen | |||
| Plastic microtubes 1.5 mL | Eppendorf | ||
| Fine dissection forceps | |||
| Foetal bovine serum | Gibco | 10270-106 | heat inactivated prior to use |
| Glass dishes for dissection | |||
| Ice bucket | |||
| P1000 | Gilson | ||
| P20 | Gilson | ||
| P200 | Gilson | ||
| Papain | 50U/mL stock | ||
| PBS | home made | ||
| Penicillin-Streptomycin | Gibco | 15070-063 | |
| Schneider’s Drosophila medium | Gibco | 21720-001 | |
| Tipone 1250 μL graduated tip | Starlab | S1161-1820 | |
| Tipone 200 μL bevelled tip | Starlab | S1161-1800 | |
| TrypLE Express Enzyme | Gibco | 12604013 |
Citar este artigo
Drosophila Male Accessory Gland Dissection: A Method to Isolate Secondary Cells. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20100, doi: (2023).