Drosofilia Dissezione ghiandola accessoria maschile: un metodo per isolare le cellule secondarie
Published: April 30, 2023
Abstract
Fonte: Immarigeon, C., et al. J. Vis. Exp. (2019).
Questo video descrive la dissezione delle ghiandole accessorie dalle mosche maschili e mostra un esempio in cui la ghiandola isolata verrà dissociata in una singola sospensione cellulare.
Protocol
Questo protocollo è un estratto da Immarigeon et al.,Un protocollo basato su FACS per isolare l’RNA dalle cellule secondarie delle ghiandole accessorie maschili di Drosophila, J. Vis. Exp. (2019). 1. Soluzioni e preparazione dei materiali Preparare le soluzioni seguenti. Prepare Serum Supplemented Medium (SSM): il mezzo Drosophila di Schneider completato da siero bovino fetale inattivato al calore al 10% e all’1% di pen…
Materials
| Binocular microscope for dissection | |||
| Binocular with light source for GFP | |||
| Bunsen | |||
| Plastic microtubes 1.5 mL | Eppendorf | ||
| Fine dissection forceps | |||
| Foetal bovine serum | Gibco | 10270-106 | heat inactivated prior to use |
| Glass dishes for dissection | |||
| Ice bucket | |||
| P1000 | Gilson | ||
| P20 | Gilson | ||
| P200 | Gilson | ||
| Papain | 50U/mL stock | ||
| PBS | home made | ||
| Penicillin-Streptomycin | Gibco | 15070-063 | |
| Schneider’s Drosophila medium | Gibco | 21720-001 | |
| Tipone 1250 μL graduated tip | Starlab | S1161-1820 | |
| Tipone 200 μL bevelled tip | Starlab | S1161-1800 | |
| TrypLE Express Enzyme | Gibco | 12604013 |
Citar este artigo
Drosophila Male Accessory Gland Dissection: A Method to Isolate Secondary Cells. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20100, doi: (2023).