प्रणाली पूरक प्रोटीन के एक समूह है कि जब सक्रिय सेल lysis लक्ष्य के लिए नेतृत्व और opsonisation माध्यम phagocytosis सुविधा है. व्यक्तिगत पूरक घटक मात्रा निर्धारित हो सकता है लेकिन इस मार्ग की गतिविधि के रूप में किसी भी जानकारी प्रदान नहीं करता है सकते हैं. दर्पण₅₀ शास्त्रीय पूरक मार्ग (चित्र 1) के सक्रियण के लिए एक स्क्रीनिंग परख है और यह कमी, अभाव और / या मार्ग के किसी भी घटक की निष्क्रियता के प्रति संवेदनशील है. दर्पण₅₀ शास्त्रीय भेड़ लाल रक्त कोशिकाओं (SRBC) पूर्व खरगोश विरोधी भेड़ लाल रक्त कोशिका एंटीबॉडी (haemolysin) के साथ लेपित lyse मार्ग के सीरम पूरक घटकों के कार्यात्मक क्षमता का परीक्षण. जब प्रतिरक्षी – लेपित SRBC परीक्षण सीरम, पूरक के शास्त्रीय मार्ग सक्रिय है और haemolysis परिणाम के साथ incubated हैं. यदि एक पूरक घटक अनुपस्थित है, दर्पण₅₀ स्तर शून्य होगा, अगर शास्त्रीय मार्ग के एक या अधिक घटकों घट रहे हैं, दर्पण₅₀ कम हो जाएगा. बेहतर अवगत SRBC की एक निश्चित मात्रा प्रत्येक सीरम कमजोर पड़ने के लिए जोड़ा जाता है. ऊष्मायन के बाद, मिश्रण और centrifuged haemolysis की डिग्री 540nm पर सतह पर तैरनेवाला में जारी हीमोग्लोबिन के absorbance को मापने के द्वारा मात्रा निर्धारित है. पूरक गतिविधि की राशि सीरम परीक्षण के विभिन्न dilutions की क्षमता की जांच करने के लिए एंटीबॉडी लेपित SRBC lyse द्वारा निर्धारित किया जाता है. यह वीडियो प्रयोगात्मक शास्त्रीय पूरक मार्ग के पूरक गतिविधि के स्तर का विश्लेषण करने में शामिल कदम की रूपरेखा.