CRAF-14-3-3 Interaction Analysis in Live Cells Using a BRET-Based Approach

March 01, 2024

Canlı Hücrelerde CRAF'ın 14-3-3 Proteinleri ile Etkileşimlerinin Ölçülmesi için Biyolüminesans Rezonans Enerji Transferi (BRET) Tabanlı Test

01:07 min
•

293FT Hücrelerin pCMV5-NanoLuc-CRAF ve pCMV5-14-3-3ζ-Halo Ekspresyon Yapıları ile Transfeksiyonu

02:01 min
•

BRET Emisyon Testi için pCMV5-NanoLuc-CRAF ve pCMV5-14-3-3ζ-Halo ile Transfekte Edilmiş 293FT Hücrelerinin Hazırlanması

03:39 min
•
1Department of Cell and Molecular Pharmacology and Experimental Therapeutics,Medical University of South Carolina, 2Hollings Cancer Center,Medical University of South Carolina, 3Laboratory of Cell and Developmental Signaling, Center for Cancer Research,National Cancer Institute-Frederick

Summary

Tadução automática

Bu protokol, canlı hücrelerde CRAF kinazın 14-3-3 proteinleri ile etkileşimlerini ölçmek için BRET tabanlı bir testi tanımlar. Protokol, hücrelerin hazırlanması, BRET emisyonlarının okunması ve veri analizi için adımların ana hatlarını çizmektedir. Tahlil optimizasyonu için uygun kontrollerin tanımlanması ve sorun gidermenin yer aldığı örnek bir sonuç da sunulmaktadır.

Article