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뮐러 신경교 세포에서 2',7'-디클로로플루오레세인 디아세테이트 프로브 및 유세포 분석기를 사용한 반응성 산소 종의 정량화
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Quantification of Reactive Oxygen Species Using 2′,7′-Dichlorofluorescein Diacetate Probe and Flow-Cytometry in Müller Glial Cells
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뮐러 신경교 세포에서 2',7'-디클로로플루오레세인 디아세테이트 프로브 및 유세포 분석기를 사용한 반응성 산소 종의 정량화

DOI:
10.3791/63337-v

•

14:25 min

•

May 13, 2022

•

, , , ,
1Departamento de Bioquímica Clínica, Facultad de Ciencias Químicas,Universidad Nacional de Córdoba, 2Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología (CIBICI),Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas (CONICET), 3Instituto de Investigación Médica Mercedes y Martín Ferreyra (INIMEC),Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas (CONICET)

章

  • 00:00Introduction
  • 01:37Performing the Assay
  • 04:21Cells Preparaion for Flow Cytometry
  • 06:57Data Acquisition in a Flow Cytometer
  • 09:00Analysis of the Acquired Data
  • 12:07Representative Results
  • 13:37Conclusion

概要

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여기에서는 뮐러 아교 세포 (MGC)에서 2',7'-dichlorofluorescein diacetate probe (DCFH-DA)를 사용하여 세포 반응성 산소 종 (ROS)을 검출하기위한 체계화되고 접근 가능하며 재현 가능한 프로토콜을 제안합니다. 이 방법은 유세포 분석기로 총 세포 ROS 수준을 정량화합니다. 이 프로토콜은 사용하기 매우 쉽고 적합하며 재현 가능합니다.

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Reactive Oxygen SpeciesROS2′7′-dichlorofluorescein DiacetateDCFDAFlow CytometryOxidative StressCell MembraneEsterasesDichlorofluoresceinAntioxidantROS InducerDMEMPBSCentrifugationFACS Buffer

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