O ANS se liga ao domínio N recombinante Ca2+-ATPase. Os espectros de fluorescência exibem um padrão semelhante ao FRET após a excitação em um comprimento de onda de 295 nm. A modificação química mediada pelo NBS de Trp sacia a fluorescência do domínio N, o que leva à ausência de transferência de energia (FRET) entre o resíduo Trp e o ANS.