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2',7'-디클로로디하이드로플루오레세신 디아세테이트 염색에 의한 부착세포에서 총 반응성 산소종 검출
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JoVE Journal 生化学
Detection of Total Reactive Oxygen Species in Adherent Cells by 2′,7′-Dichlorodihydrofluorescein Diacetate Staining
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2',7'-디클로로디하이드로플루오레세신 디아세테이트 염색에 의한 부착세포에서 총 반응성 산소종 검출

DOI:
10.3791/60682-v

•

04:53 min

•

June 23, 2020

•

,
1生化学・分子生物学科,University of New Mexico

章

  • 00:04Introduction
  • 00:32Cell Seeding and DCFH-DA Solution Preparation
  • 01:32DCFH-DA Staining
  • 02:12Image Acquisition and Intensity Measurement
  • 03:29Results: Iron Treatment Increases ROS in Colorectal Cancer Cells
  • 04:07Conclusion

概要

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여기서, 우리는 2',7'-디클로로디하이드로플루오레세인 디아세테이트(DCFH-DA)를 사용하여 총 세포 반응성 산소 종(ROS)을 검출하는 프로토콜을 제시한다. 이 방법은 형광 현미경으로 부착 된 세포에서 세포 ROS 국소화를 시각화하고 형광 판 판독기와 ROS 강도를 정량화 할 수 있습니다. 이 프로토콜은 간단하고 효율적이며 비용 효율적입니다.

タグ

Reactive Oxygen SpeciesDCFH-DA StainingAdherent CellsFluorescence MicroscopyFluorescence Plate ReaderOxidative StressHCT116 Colorectal Cancer CellsFerrous SulfateDoxorubicinRIPA BufferBradford AssayFluorescence Intensity Quantification

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