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La cryoconservation de tissu cortical Blocs pour la génération des cultures de neurones hautement enrichi
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November 11, 2010
DOI:
概要
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Ici, nous décrivons une méthode pour la cryoconservation efficace et dégel du cortex cérébral des blocs de tissus pour générer hautement enrichi cultures neuronales. Ce protocole simple fournit la flexibilité pour la génération plus tard, des neurones, des astrocytes et des cultures de cellules neuronales précurseur.
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CryopreservationNeuronal CulturesFreezing MediumDimethyl Sulfoxide (DMSO)Hank’s Buffered Salt Solution (HBSS)CryovialsRate-controlled Freezing ContainerPost-thaw ProcessingDissociationNeuronal-enriched CulturesNeuritic GrowthImmunocytochemical StainingAstrocytic MarkerGlial Fibrillary Acidic Protein (GFAP)Neuronal MarkerBeta-tubulin Class IIINeural Precursor Cell CulturesNeurospheresDifferentiating Conditions
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Rahman, A. S., Parvinjah, S., Hanna, M. A., Helguera, P. R., Busciglio, J. Cryopreservation of Cortical Tissue Blocks for the Generation of Highly Enriched Neuronal Cultures. J. Vis. Exp. (45), e2384, doi:10.3791/2384 (2010).
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