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Tecniche di Imaging Ca 2 + Segnalazione di sperma umano
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June 16, 2010
DOI:
概要
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Stimolo-evocato [Ca<sup> 2 +</sup>] I segnali dei singoli spermatozoi umani sono valutati. Cellule mobili sono caricati con Ca<sup> 2 +</sup> Sensibili colorante fluorescente (AM-estere metodo) e immobilizzato in una camera perfusable. Le cellule sono ripreso dal time-lapse microscopia a fluorescenza e stimolato attraverso il medium di perfusione. Le risposte di singole cellule (o regioni) sono analizzati in linea con Excel.
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Fluorescence MicroscopyCa2+ SignalingHuman SpermFluorescent DyesLoading MethodPhysiological StimulationCapacitating ConditionsAM EsterCytoplasmVisible Wavelength DyesRatiometric RecordingAdvantages And DisadvantagesImaging ChamberPoly-D-lysine Coated CoverslipPerfusion ApparatusTime-lapse AcquisitionRegions Of InterestData Normalization
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Nash, K., Lefievre, L., Peralta-Arias, R., Morris, J., Morales-Garcia, A., Connolly, T., Costello, S., Kirkman-Brown, J. C., Publicover, S. J. Techniques for Imaging Ca2+ Signaling in Human Sperm. J. Vis. Exp. (40), e1996, doi:10.3791/1996 (2010).
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