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Técnicas de imagem Ca 2 + Sinalização no esperma humano
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生物学
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JoVE Journal 生物学
Techniques for Imaging Ca2+ Signaling in Human Sperm

Técnicas de imagem Ca 2 + Sinalização no esperma humano

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•

07:38 min

•

June 16, 2010

DOI:

10.3791/1996-v

DOI:
10.3791/1996-v

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07:38 min
June 16, 2010

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1School of Biosciences,University of Birmingham, 2School of Medicine,University of Birmingham, 3Centre for Human Reproductive Science,Birmingham Women’s Hospital

概要

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Estímulo evocado [Ca<sup> 2 +</sup> Sinais] i de espermatozóides humanos individuais são avaliados. Células móveis são carregados com Ca<sup> 2 +</sup> Sensíveis ao corante fluorescente (AM-éster de método) e imobilizada em uma câmara perfusable. Células são gravadas por lapso de tempo de microscopia de fluorescência e estimulado através do meio de perfusão. Respostas de células individuais (ou regiões) são analisados ​​off-line usando o Excel.

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Fluorescence MicroscopyCa2+ SignalingHuman SpermFluorescent DyesLoading MethodPhysiological StimulationCapacitating ConditionsAM EsterCytoplasmVisible Wavelength DyesRatiometric RecordingAdvantages And DisadvantagesImaging ChamberPoly-D-lysine Coated CoverslipPerfusion ApparatusTime-lapse AcquisitionRegions Of InterestData Normalization

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Nash, K., Lefievre, L., Peralta-Arias, R., Morris, J., Morales-Garcia, A., Connolly, T., Costello, S., Kirkman-Brown, J. C., Publicover, S. J. Techniques for Imaging Ca2+ Signaling in Human Sperm. J. Vis. Exp. (40), e1996, doi:10.3791/1996 (2010).

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