כאן, אנו משתמשים ב- HD-MEA כדי להתעמק בדינמיקה חישובית של הרכבים עצביים בקנה מידה גדול, במיוחד בהיפוקמפוס, מעגלי פקעות ריח ורשתות נוירונים אנושיות. לכידת פעילות מרחבית-זמנית, בשילוב עם כלים חישוביים, מספקת תובנות לגבי מורכבות ההרכב העצבי. השיטה משפרת את ההבנה של תפקודי המוח, ועשויה לזהות סמנים ביולוגיים וטיפולים להפרעות נוירולוגיות.
רשתות עצביות בקנה מידה גדול והמיקרו-מעגלים המבוזרים המורכבים שלהן חיוניים ליצירת תפיסה, קוגניציה והתנהגות הנובעות מדפוסים של פעילות עצבית מרחבית-זמנית. דפוסים דינמיים אלה הנובעים מקבוצות תפקודיות של הרכבים עצביים מקושרים מאפשרים חישובים מדויקים לעיבוד וקידוד מידע עצבי בקנה מידה רב, ובכך מניעים תפקודי מוח גבוהים יותר. כדי לחקור את העקרונות החישוביים של דינמיקה עצבית העומדת בבסיס מורכבות זו ולחקור את ההשפעה הרב-ממדית של תהליכים ביולוגיים בבריאות ובמחלות, הקלטות סימולטניות בקנה מידה גדול הפכו לאינסטרומנטליות. כאן, מערך מיקרואלקטרודות בצפיפות גבוהה (HD-MEA) משמש לחקר שתי שיטות של דינמיקה עצבית – מעגלי פקעות ההיפוקמפוס וחוש הריח מפרוסות מוח של עכבר ex-vivo ורשתות עצביות מתרביות תאים במבחנה של תאי גזע פלוריפוטנטיים המושרים על ידי בני אדם (iPSCs). פלטפורמת HD-MEA, עם 4096 מיקרואלקטרודות, מאפשרת הקלטות לא פולשניות, מרובות אתרים, נטולות תוויות של דפוסי ירי חוץ-תאיים מאלפי הרכבים עצביים בו זמנית ברזולוציה מרחבית-זמנית גבוהה. גישה זו מאפשרת אפיון של מספר תכונות אלקטרופיזיולוגיות ברחבי הרשת, כולל דפוסי פעילות דוקרנים יחידים/מרובי יחידות ותנודות פוטנציאליות בשדה המקומי. כדי לבחון נתונים עצביים רב-ממדיים אלה, פיתחנו מספר כלים חישוביים המשלבים אלגוריתמים של למידת מכונה, זיהוי וסיווג אירועים אוטומטיים, תורת הגרפים וניתוחים מתקדמים אחרים. על ידי השלמת צינורות חישוביים אלה עם פלטפורמה זו, אנו מספקים מתודולוגיה לחקר הדינמיקה הגדולה, הרב-ממדית והרב-מודאלית ממכלולי תאים לרשתות. זה עשוי לקדם את ההבנה שלנו של תפקודי מוח מורכבים ותהליכים קוגניטיביים בבריאות ובחולי. מחויבות למדע פתוח ותובנות לגבי דינמיקה עצבית חישובית בקנה מידה גדול יכולה לשפר מודלים בהשראת המוח, מחשוב נוירומורפי ואלגוריתמים של למידה עצבית. יתר על כן, הבנת המנגנונים הבסיסיים של חישובים עצביים לקויים בקנה מידה גדול ודינמיקת המיקרו-מעגלים המקושרים ביניהם עשויה להוביל לזיהוי סמנים ביולוגיים ספציפיים, ולסלול את הדרך לכלי אבחון מדויקים יותר ולטיפולים ממוקדים להפרעות נוירולוגיות.
הרכבים עצביים, המכונים לעתים קרובות מכלולי תאים, הם מרכזיים בקידוד עצבי, ומאפשרים חישובים מורכבים לעיבודמידע עצבי בקנה מידה 1,2,3. הרכבים אלה עומדים בבסיס היווצרותן של רשתות נוירונים נרחבות והמיקרו-מעגלים הניואנסיים שלהן4. רשתות כאלה ודפוסי התנודה שלהן מניעים תפקודי מוח מתקדמים, כולל תפיסה וקוגניציה. בעוד מחקר מקיף בחן סוגים עצביים ספציפיים ומסלולים סינפטיים, הבנה עמוקה יותר של האופן שבו נוירונים יוצרים בשיתוף פעולה הרכבות תאים ומשפיעים על עיבוד מידע מרחבי-זמני בין מעגלים ורשתות נותרה חמקמקה5.
פרוסות מוח חריפות ואקס-ויו הן כלים אלקטרופיזיולוגיים מרכזיים לחקר מעגלים עצביים שלמים, המציעות סביבה מבוקרת לבדיקת דפוסי פעילות תנודתית של תפקוד עצבי, שידור סינפטי וקישוריות, עם השלכות בבדיקות פרמקולוגיות ובמודלים של מחלות 6,7,8. פרוטוקול מחקר זה מדגיש שני מעגלים מרכזיים במוח – ההיפוקמפוס-קליפת המוח (HC) המעורבת בתהליכי למידה וזיכרון 9,10, ופקעת הריח (OB) האחראית להבחנה בריח 11,12,13. בשני האזורים האלה, נוירונים תפקודיים חדשים נוצרים ברציפות על-ידי נוירוגנזה בוגרת לאורך כל החיים במוחות של יונקים14. שני המעגלים מדגימים דפוסי פעילות עצבית דינמית רב-ממדית ופלסטיות מובנית המשתתפים בחיווט מחדש של הרשת העצבית הקיימת ומאפשרים אסטרטגיות עיבוד מידע חלופיות בעת הצורך15,16.
מודלים חריפים של פרוסות מוח ex-vivo הם הכרחיים להתעמקות בתפקוד המוח ולהבנת מנגנוני מחלה ברמת המיקרו-מעגל. עם זאת, תרביות תאים חוץ-גופיות שמקורן ברשתות עצביות של תאי גזע פלוריפוטנטיים מושרים אנושיים (iPSCs) מציעות אפיק מבטיח של מחקר תרגומי, המקשר בצורה חלקה בין ממצאים מניסויים בבעלי חיים לטיפול קליני פוטנציאלי בבני אדם17,18. בדיקות מבחנה אלה הממוקדות בבני אדם משמשות פלטפורמה אמינה להערכת רעילות פרמקולוגית, מאפשרות סינון תרופות מדויק, ומקדמת מחקר באסטרטגיות טיפוליות חדשניות מבוססות תאים19,20. מתוך הכרה בתפקיד המרכזי של המודל העצבי iPSC, הקדשנו את המודול השלישי של מחקר פרוטוקול זה כדי לחקור ביסודיות את המאפיינים הפונקציונליים של הרשתות הנגזרות ממנו ולכוונן את פרוטוקולי תרביות התאים הקשורים.
מודולים עצביים אלקטרוגניים אלה נחקרו בדרך כלל באמצעות טכניקות כמו סידן (הדמיית Ca2+), רישומי מהדק טלאי ומערכי מיקרואלקטרודות בצפיפות נמוכה (LD-MEA). בעוד שהדמיית Ca2+ מציעה מיפוי פעילות של תא יחיד, זוהי שיטה מבוססת תיוג תאים המעוכבת על ידי הרזולוציה הטמפורלית הנמוכה שלה והאתגרים בהקלטות ארוכות טווח. LD-MEAs חסרים דיוק מרחבי, בעוד שמהדק טלאי, בהיותה טכניקה פולשנית באתר יחיד ומייגעת, מניבה לעתים קרובות שיעור הצלחה נמוך 21,22,23. כדי להתמודד עם אתגרים אלה ולחקור ביעילות פעילות ברחבי הרשת, הקלטות עצביות סימולטניות בקנה מידה גדול התפתחו כגישה מרכזית להבנת העקרונות החישוביים של דינמיקה עצבית העומדת בבסיס מורכבות המוח והשלכותיהם על בריאות ומחלות24,25.
בפרוטוקול JoVE זה, אנו מדגימים שיטת הקלטה עצבית בקנה מידה גדול המבוססת על MEA (HD-MEA) בצפיפות גבוהה ללכידת פעילות עצבית מרחבית-טמפורלית בשיטות מוח שונות, כולל מעגלי פקעות בהיפוקמפוס ובפקעות הריח מפרוסות חדות במוח עכבר ex-vivo (איורים 1A-C) ורשתות נוירונים אנושיות שמקורן במבחנה iPSC (איורים 1D-E), שדווחו בעבר על-ידי הקבוצה שלנו ועמיתים אחרים26,27,28,29,30,31,32,33,34,35. ה-HD-MEA, הבנוי על טכנולוגיית מוליכים למחצה (CMOS) משלימים של מתכת-תחמוצת-תחמוצת, מתגאה במעגלים חשמליים על שבב ובהגברה, המאפשרים הקלטות של תת-אלפיות השנייה על פני מערךשל 7 מ”מ בגודל2 בגודל 36. גישה לא פולשנית זו לוכדת דפוסי ירי חוץ-תאיים מרובי אתרים, נטולי תוויות, מאלפי הרכבים עצביים בו זמנית באמצעות 4096 מיקרואלקטרודות ברזולוציה מרחבית-טמפורלית גבוהה, וחושפת את הדינמיקה המורכבת של פוטנציאלי שדה מקומיים (LFPs) ופעילות דוקרנים רב-יחידתיים (MUA)26,29.
בהתחשב בהיקף הנתונים העצום שנוצר על ידי מתודולוגיה זו, מסגרת אנליטית מתוחכמת היא חיונית, אך מציבה אתגרים37. פיתחנו כלים חישוביים הכוללים זיהוי אירועים אוטומטי, סיווג, תורת הגרפים, למידת מכונה וטכניקות מתקדמות אחרות (איור 1F)26,29,38,39. בשילוב HD-MEA עם כלים אנליטיים אלה, פותחה גישה הוליסטית כדי לחקור את הדינמיקה המורכבת ממכלולי תאים בודדים לרשתות עצביות רחבות יותר על פני שיטות עצביות מגוונות. גישה משולבת זו מעמיקה את אחיזתנו בדינמיקה החישובית בתפקודי מוח נורמליים ומציעה תובנות לגבי אנומליות הקיימות בתנאים פתולוגיים28. יתר על כן, תובנות מגישה זו יכולות להניע התקדמות במודלים בהשראת המוח, מחשוב נוירומורפי ואלגוריתמים של למידה עצבית. בסופו של דבר, שיטה זו טומנת בחובה הבטחה בחשיפת מנגנוני הליבה מאחורי שיבושים ברשת העצבית, זיהוי פוטנציאלי של סמנים ביולוגיים, והנחיית יצירת כלי אבחון מדויקים וטיפולים ממוקדים למצבים נוירולוגיים.
הדינמיקה המורכבת של הפעילות העצבית המרחבית-זמנית, הנובעת מהרכבים עצביים מקושרים, הייתה מזה זמן רב נושא לתככים במדעי המוח. מתודולוגיות מסורתיות, כגון מהדק טלאים, MEA סטנדרטי והדמיית Ca2+, סיפקו תובנות חשובות לגבי מורכבות המוח. עם זאת, לעתים קרובות הם נכשלים בלכידת הדינמיקה החישובית המקיפה ברחבי הרשת 21,22,23. הפרוטוקול הטכני של פלטפורמת HD-MEA, כפי שמפורט במחקר JoVE זה, מייצג קפיצת מדרגה משמעותית, ומציע מבט פנורמי על דינמיקה עצבית בשיטות מגוונות, החל ממכלולי תאים ועד רשתות נרחבות (כלומר, פרוסות מוח חריפות של עכברי ex-vivo ורשתות iPSC אנושיות במבחנה)26,29,30,32.
פרוסות מוח חריפות של עכברי ex-vivo היו כלי בסיסי במחקר עצבי, וסייעו לחקירות מולקולריות ומעגליות 6,7. עם זאת, האתגר של שמירה על כדאיות הרקמה היה צוואר בקבוק מתמשך. הפרוטוקול המתואר במחקר זה מציג שינויים קריטיים כדי למטב את האיכות ואת תוחלת החיים של פרוסות אלה כדי לנצל את היתרונות שלהם על פלטפורמת HD-MEA. פרוטוקול זה מדגיש את החשיבות של – i) השגת אחידות פרוסות, שעבורה השימוש בויברטומה מועדף על פני מסוק רקמות בשל דיוקו ומזעור הנזק לרקמות, למרות הפשרה של זמני חיתוך ארוכים יותר. ii) הבטחת קרבוגניזציה מתמדת לאורך כל התהליך, מהמיצוי ועד ההקלטה, כדי לשמור על כדאיות הרקמות. iii) ויסות הטמפרטורה ומתן זמן התאוששות הולם לפני ההקלטה. 4) שימוש בגוש אגרוז או עובש לייצוב המוח, למניעת קריעה ולמזעור מגע דבק. v) שמירה על קצבי זרימה אופטימליים של aCSF קרבוגני בתוך מאגר HD-MEA כדי להבטיח את בריאות הפרוסה תוך הימנעות מבעיות כמו ניתוק, רעש וסחף (טבלה 2).
הן עבור פרוסות מוח של עכבר והן עבור תכשירי iPSC אנושיים, שיפור צימוד ממשק אלקטרודה-רקמה הוא בעל חשיבות עליונהשל 30,46,47. הפרוטוקול שלנו מדגיש את החשיבות של שימוש במולקולה מעודדת הדבקה Poly-dl-ornithine (PDLO). מולקולה זו לא רק מגדילה את שטח הפנים לגילוי אותות חשמליים, אלא גם מגבירה את המוליכות החשמלית46. בכך הוא מקדם היצמדות תאית, גדילה ופיתוח תכונות רשת פונקציונליות. אופטימיזציה כזו ממלאת תפקיד מרכזי בשיפור היעילות של פלטפורמת HD-MEA. זה, בתורו, מבטיח ניתוח מדויק ועקבי של קונקטום ex-vivo ו– in-vitro בקנה מידה מיקרוסקולרי ורצפי הירי המרחבי-זמני שלהם. יש לציין כי PDLO הוכח כבעל ביצועים טובים יותר ממצעים אחרים כמו פוליאתילניאמין (PEI) ופולי-ל-אורניתין (אש”ף) בקידום פעילות ירי ספונטנית והיענות לגירויים חשמליים בתרביות עצביות. בנוסף, PDLO שימש לפונקציונליות פני השטח ב- HD-MEA והוכח כמשפר את ממשק הצימוד של פרוסת אלקטרודה ומגביר את יחס האות לרעש הן בפרוסות OB והן בפרוסות HC26,29. התוספת של עוגן פלטינה שנבנה בהתאמה אישית מגדילה עוד יותר את צימוד ממשק פרוסת האלקטרודה, מה שמוביל להקלטות עם יחס אות לרעש גבוה יותר.
השימוש ב-HD-MEA הן עבור פרוסות מוח של עכברי ex-vivo והן עבור רשתות iPSC אנושיות במבחנה מציג שיטה המיומנת בחקר דינמיקה נרחבת, רב-ממדית ורב-מודאלית. גישה חדשנית זו, עם זאת, מביאה אתגרים משמעותיים, במיוחד בניהול נתונים 48,49,50,51. הקלטת HD-MEA אחת הנרכשת בתדר דגימה של 18 קילוהרץ/אלקטרודה מפיקה כמות מדהימה של נתונים בנפח 155 מגה-בתים לשנייה. נפח הנתונים עולה במהירות כאשר משקללים פרוסות מרובות, מצבים פרמקולוגיים מגוונים או תקופות הקלטה ממושכות. זרם כזה של מידע דורש תשתיות אחסון איתנות וכלי חישוב מתקדמים לייעול העיבוד. היכולת של פלטפורמת HD-MEA לאסוף בו זמנית נתונים מאלפי הרכבים עצביים היא גם ברכה וגם משוכה. הוא מספק תובנות עילאיות על הדינמיקה החישובית של תפקודי המוח, אך הוא גם דורש מסגרת אנליטית מעודנת. בפרוטוקול JoVE זה, סיפקנו דוגמאות לאסטרטגיות חישוביות, כולל זיהוי אירועים בקנה מידה גדול, סיווג, תורת הגרפים, ניתוח תדרים ולמידת מכונה. שיטות אלה מדגישות את המאמצים האינטנסיביים שנעשו כדי להתמודד עם האתגרים של ניתוח נתונים עצביים מורכבים. עם זאת, עדיין יש מקום רב לפיתוח כלים חישוביים מתקדמים יותר לניתוח מערכי נתונים עצביים רב-ממדיים אלה. חמושה בכלים ובמתודולוגיות המתאימים, הפוטנציאל של פלטפורמת HD-MEA גדל, ומציעה תובנות מעמיקות על המורכבות של תפקודי המוח במצבים בריאים ופתולוגיים כאחד.
בעיקרו של דבר, פלטפורמת HD-MEA, כאשר היא משולבת עם הפרוטוקולים המפורטים והכלים החישוביים שנדונו, מציעה גישה טרנספורמטיבית להבנת פעולתו המורכבת של המוח. על-ידי לכידת דינמיקות בקנה מידה גדול, רב-ממדי ורב-מודאלי, הוא מספק תובנות יקרות ערך לגבי תהליכים כגון למידה, זיכרון ועיבוד מידע. יתר על כן, היישום שלה ברשתות iPSC אנושיות במבחנה יש פוטנציאל לחולל מהפכה בסינון תרופות וברפואה מותאמת אישית. עם זאת, בעוד פלטפורמה זו מייצגת התקדמות משמעותית במחקר מדעי המוח, חיוני להכיר ולטפל באתגרים הטכניים הטבועים. עם שכלול מתמשך ושילוב של כלים חישוביים מתקדמים, פלטפורמת HD-MEA עומדת לפתוח עידן חדש של כלי אבחון מדויקים, זיהוי סמנים ביולוגיים ספציפיים וטיפולים ממוקדים להפרעות נוירולוגיות.
The authors have nothing to disclose.
מחקר זה נתמך על ידי קרנות מוסדיות (DZNE), אגודת הלמהולץ במסגרת קרן התיקוף של הלמהולץ (HVF-0102), ובית הספר הבינלאומי למוסמכים בדרזדן לביו-רפואה וביו-הנדסה (DIGS-BB). ברצוננו גם להודות לפלטפורמה לניסויים התנהגותיים בבעלי חיים ב- DZNE-Dresden (אלכסנדר גארת, אן קרסינסקי, סנדרה גינתר וינס ברגמן) על תמיכתם. ברצוננו להכיר בכך שחלק מאיור 1 נוצר באמצעות BioRender.com הפלטפורמה.
150 mm Glass Petri Dish | generic | generic | Brain Preparation Workspace, Brain Slice Recording Workspace |
0.22 μm Sterile Filter Unit | Assorted | Assorted | Assorted |
90 mm Plastic Culture Dish | TPP | 93100 | Brain Preparation Workspace, Brain Slice Recording Workspace |
Agarose | Roth | 6351.5 | Brain Preparation Workspace |
Agarose Mold | CUSTOM | CUSTOM | Brain Preparation Workspace; Custom designed 3D Printer Design, available upon request |
Aluminum Foil | generic | generic | Brain Extraction Workspace |
Anesthesia chamber | generic | generic | Brain Extraction Workspace; Assorted Beaker, Bedding etc |
Ascorbic Acid | Sigma Aldrich | A4544-25G | Solution Preparation Workspace |
Assorted Beakers | generic | generic | Solution Preparation Workspace; 50 mL |
Assorted Luers | Cole Parmer | 45511-00 | Brain Slice Recording Workspace |
Assorted Volumetric flasks | generic | generic | Solution Preparation Workspace; 500 mL, 1 L |
B27 Supplement | Life Technologies | 17504-044 | BrainXell Commercial Supplier Protocol |
BDNF | Peprotech | 450-02 | BrainXell Commercial Supplier Protocol |
Biological Safety Cabinet with UV Lamp | Assorted | Assorted | HD-MEA Coating, Plating, Mainainance Workspace |
BrainPhys Neuronal Medium | STEMCELL Technologies | 05790 | CDI, and BrainXell Commerical Supplier Protocol |
Brainwave Software | 3Brain AG | Version 4 | Brain Slice and Human iPSC Recording Workspace |
BrainXell Glutamatergic Neuron Assay | BrainXell | BX-0300 | BrainXell Commercial Supplier Protocol |
CaCl2 | Sigma Aldrich | 21115-100ML | Solution Preparation Workspace |
Carbogen | generic | generic | All Workspaces; 95%/5% O2 and CO2 mixture |
Cell Culture Incubator | Assorted | Assorted | Assorted |
CMOS-based HD-MEA chip | 3Brain AG | CUSTOM | Brain Slice and Human iPSC Recording Workspace |
Conical Tubes, 50 mL, Falcon (Centrifuge Tubes) | STEMCELL Technologies | 38010 | CDI Commerical Supplier Protocol |
Crocodile Clip Grounding Cables | JWQIDI | B06WGZG17W | Brain Slice Recording Workspace |
Curved Forceps | FST | 11052-10 | Brain Extraction Workspace |
DMEM/F12 Medium | Life Technologies | 11330-032 | BrainXell Commercial Supplier Protocol |
Dulbecco’s Phosphate Buffered Saline without Ca2+ and Mg2+ (D-PBS) | STEMCELL Technologies | 37350 | CDI Commerical Supplier Protocol |
Filter Paper | Macherey-Nagel | 531 011 | Brain Preparation Workspace |
Fine Brush | Leonhardy | 773 | Brain Slice Preparation Workspace, Brain Slice Recording Workspace |
Forceps | VITLAB | 67895 | Brain Slice Recording Workspace |
GDNF | Peprotech | 450-10 | BrainXell Commercial Supplier Protocol |
Geltrex | Life Technologies | A1413201 | BrainXell Commercial Supplier Protocol |
Glass pasteur pipette | Roth | 4518 | Brain Slice Preparation Workspace, Brain Slice Recording Workspace |
Glucose | Sigma Aldrich | G7021-1KG | Solution Preparation Workspace |
GlutaMAX | Life Technologies | 35050-061 | BrainXell Commercial Supplier Protocol |
Gravity-based Perfusion System | ALA | VC3-8xG | Brain Slice Recording Workspace |
HD-MEA Recording platform | 3Brain AG | CUSTOM | Brain Slice and Human iPSC Recording Workspace |
Heater | Warner Instruments | TC-324C | Brain Slice Recording Workspace |
Hemocytometer or Automated Cell Counter | Assorted | Assorted | HD-MEA Coating, Plating, Mainainance Workspace |
Hypo Needles | Warner Instruments | 641489 | Brain Slice Recording Workspace |
iCell GlutaNeurons Kit, 01279 | CDI | R1061 | CDI Commerical Supplier Protocol |
Iris Scissors | Vantage | V95-304 | Brain Extraction Workspace |
Isoflurane | Baxter | HDG9623 | Brain Extraction Workspace |
KCl | Sigma Aldrich | P5405-250G | Solution Preparation Workspace |
Laminin | Sigma-Aldrich | L2020 | CDI Commerical Supplier Protocol |
Liquid Nitrogen Storage Unit | Assorted | Assorted | HD-MEA Coating, Plating, Mainainance Workspace |
Magnetic Stirrer | generic | generic | Solution Preparation Workspace |
Metal Screws | Thorlabs | HW-KIT2/M | Brain Slice Recording Workspace |
MgCl2 | Sigma Aldrich | M1028-100ML | Solution Preparation Workspace |
MgSO4 | Sigma Aldrich | 63138-250G | Solution Preparation Workspace |
Microdissection Tool Holder | Braun | 4606108V | Brain Slice Preparation Workspace, Brain Slice Recording Workspace |
Microdissection Tool Needle | Braun | 9186166 | Brain Slice Preparation Workspace, Brain Slice Recording Workspace |
Modular Stereomicroscope | Leica | CUSTOM | Brain Slice Recording Workspace; custom specifications and modifications |
N2 Supplement | Life Technologies | 17502-048 | CDI, and BrainXell Commercial Supplier Protocol |
NaCl | Sigma Aldrich | S3014-1KG | Solution Preparation Workspace |
NaH2PO4 | Sigma Aldrich | S0751-100G | Solution Preparation Workspace |
NaHCO3 | Sigma Aldrich | S5761-500G | Solution Preparation Workspace |
Neurobasal Medium | Life Technologies | 21103-049 | BrainXell Commercial Supplier Protocol |
Optical Cage System | Thorlabs | Assorted | Brain Slice Recording Workspace |
Optical Table w/Breadboard | Thorlabs | SDA7590 | Brain Slice Recording Workspace |
PDLO | Sigma Aldrich | P0671 | HD-MEA Coating, Brain Slice Recording Workspace |
Penicillin-streptomycin, 100x | Thermo Fisher Scientific | 15140-122 | CDI Commerical Supplier Protocol |
Pipette tips | TipONE | S1120-8810 | Brain Slice Recording Workspace |
Pipettors | Assorted | Assorted | Assorted |
Platinum Anchor | CUSTOM | CUSTOM | Brain Slice Recording Workspace |
Polyethylene Tubing | Assorted | Assorted | Brain Slice Recording Workspace |
Pump | MasterFlex | 78018-22 | Brain Slice Recording Workspace |
Razor Blade | Apollo | 10179960 | Brain Preparation Workspace |
Reference Electrode Cell Culture Cap | CUSTOM | CUSTOM | Human iPSC Recording Workspace; Custom designed 3D Printer Design, available upon request |
Rubber Pipette Bulb | Duran Wheaton Kimble | 292000205 | Brain Slice Preparation Workspace, Brain Slice Recording Workspace |
Serological Pipettes, 1 mL, 2 mL, 5 mL, 10 mL, 25 mL | Assorted | Assorted | Assorted |
Slice Recovery Chamber | CUSTOM | CUSTOM | Brain Slice Recovery Workspace; Custom designed 3D Printer Design, available upon request |
Spatula | ISOLAB | 047.06.150 | Brain Preparation Workspace |
Sucrose | Sigma Aldrich | 84100-1KG | Solution Preparation Workspace |
Super Glue | UHU | 358221 | Brain Slice Preparation Workspace |
Surgical Scissors | Peters Instruments | BC 344 | Brain Extraction Workspace |
Tabletop Centrifuge | Assorted | Assorted | Assorted |
TGF-β1 | Peprotech | 100-21C | BrainXell Commercial Supplier Protocol |
Tissue Paper | generic | generic | Brain Extraction Workspace |
Trypan Blue | STEMCELL Technologies | 07050 | CDI Commerical Supplier Protocol |
Upright Microscope | Olympus | CUSTOM | Imaging Workspace; Custom specifications and modifications |
Vacusip | Integra | 159010 | Brain Slice Recording Workspace |
Vibratome | Leica | VT1200s | Brain Slice Preparation Workspace; Includes: Specimen plate, buffer tray, ice tray, specimen plate holding tool, vibratome blade adjusting tool |
Vibratome Blade | Personna | N/A | Brain Slice Preparation Workspace |
Water Bath | Lauda | L000595 | Brain Slice Recovery Workspace |