Burada, özellikle hipokampal, koku soğanı devreleri ve insan nöronal ağlarında, büyük ölçekli nöronal toplulukların hesaplama dinamiklerini araştırmak için HD-MEA’yı kullanıyoruz. Hesaplama araçlarıyla birlikte uzay-zamansal aktiviteyi yakalamak, nöronal topluluk karmaşıklığı hakkında içgörüler sağlar. Yöntem, beyin fonksiyonlarının anlaşılmasını geliştirir, potansiyel olarak biyobelirteçleri ve nörolojik bozukluklar için tedavileri tanımlar.
Büyük ölçekli nöronal ağlar ve bunların karmaşık dağıtılmış mikro devreleri, uzay-zamansal nöronal aktivite kalıplarından ortaya çıkan algı, biliş ve davranış oluşturmak için gereklidir. Birbirine bağlı nöronal toplulukların fonksiyonel gruplarından ortaya çıkan bu dinamik kalıplar, çok ölçekli nöral bilginin işlenmesi ve kodlanması için hassas hesaplamaları kolaylaştırır ve böylece daha yüksek beyin fonksiyonlarını yönlendirir. Bu karmaşıklığın altında yatan nöral dinamiklerin hesaplama ilkelerini araştırmak ve biyolojik süreçlerin sağlık ve hastalıktaki çok ölçekli etkisini araştırmak için, büyük ölçekli eşzamanlı kayıtlar araçsal hale geldi. Burada, nöral dinamiğin iki modalitesini incelemek için yüksek yoğunluklu bir mikroelektrot dizisi (HD-MEA) kullanılır – ex-vivo fare beyin dilimlerinden hipokampal ve koku ampul devreleri ve insan kaynaklı pluripotent kök hücrelerin (iPSC’ler) in vitro hücre kültürlerinden nöronal ağlar. 4096 mikroelektrotlu HD-MEA platformu, yüksek uzay-zamansal çözünürlükte aynı anda binlerce nöronal topluluktan hücre dışı ateşleme modellerinin non-invaziv, çok bölgeli, etiketsiz kayıtlarını sağlar. Bu yaklaşım, tek/çok birimli spiking aktivite modelleri ve yerel alan potansiyel salınımları dahil olmak üzere çeşitli elektrofizyolojik ağ çapında özelliklerin karakterizasyonuna izin verir. Bu çok boyutlu nöral verileri incelemek için makine öğrenimi algoritmaları, otomatik olay algılama ve sınıflandırma, grafik teorisi ve diğer gelişmiş analizleri içeren çeşitli hesaplama araçları geliştirdik. Bu hesaplama boru hatlarını bu platformla destekleyerek, hücre montajlarından ağlara kadar büyük, çok ölçekli ve çok modlu dinamikleri incelemek için bir metodoloji sağlıyoruz. Bu, sağlık ve hastalıktaki karmaşık beyin fonksiyonları ve bilişsel süreçler hakkındaki anlayışımızı potansiyel olarak ilerletebilir. Açık bilime bağlılık ve büyük ölçekli hesaplamalı nöral dinamiklere ilişkin içgörüler, beyinden ilham alan modellemeyi, nöromorfik hesaplamayı ve nöral öğrenme algoritmalarını geliştirebilir. Ayrıca, bozulmuş büyük ölçekli nöral hesaplamaların altında yatan mekanizmaları ve bunların birbirine bağlı mikro devre dinamiklerini anlamak, spesifik biyobelirteçlerin tanımlanmasına yol açarak nörolojik bozukluklar için daha doğru teşhis araçlarının ve hedefe yönelik tedavilerin önünü açabilir.
Genellikle hücre düzenekleri olarak adlandırılan nöronal topluluklar, nöral kodlamada çok önemlidir ve çok ölçekli nöral bilgiyi işlemek için karmaşık hesaplamaları kolaylaştırır 1,2,3. Bu topluluklar, geniş nöronal ağların ve bunların nüanslı mikro devrelerinin oluşumunu destekler4. Bu tür ağlar ve salınım kalıpları, algı ve biliş dahil olmak üzere gelişmiş beyin fonksiyonlarını yönlendirir. Kapsamlı araştırmalar belirli nöronal tipleri ve sinaptik yolları araştırmış olsa da, nöronların işbirliği içinde hücre düzeneklerini nasıl oluşturduğuna ve devreler ve ağlar arasında uzay-zamansal bilgi işlemeyi nasıl etkilediğine dair daha derin bir anlayış belirsizliğini koruyor5.
Akut, ex-vivo beyin dilimleri, bozulmamış nöral devreleri incelemek için çok önemli elektrofizyolojik araçlardır ve nöral fonksiyon, sinaptik iletim ve bağlanabilirliğin salınımlı aktivite modellerini araştırmak için kontrollü bir ortam sunar, farmakolojik testler ve hastalık modellemesindeetkileri vardır 6,7,8. Bu çalışma protokolü iki temel beyin devresini vurgulamaktadır – öğrenme ve hafıza süreçlerinde yer alan hipokampal-kortikal (HC) 9,10 ve koku ayrımcılığından sorumlu koku soğanı (OB) 11,12,13. Bu iki bölgede, memeli beyinlerinde yaşam boyunca yetişkin nörojenezi tarafından sürekli olarak yeni fonksiyonel nöronlar üretilir14. Her iki devre de, mevcut sinir ağının yeniden yapılandırılmasına katılan ve gerektiğinde alternatif bilgi işleme stratejilerini kolaylaştıran çok boyutlu dinamik sinirsel aktivite kalıpları ve doğal plastisite gösterir 15,16.
Akut, ex-vivo beyin dilimi modelleri, beyin işlevselliğini araştırmak ve mikrodevre düzeyinde hastalık mekanizmalarını anlamak için vazgeçilmezdir. Bununla birlikte, insan kaynaklı pluripotent kök hücrelerden (iPSC’ler) türetilen in vitro hücre kültürleri, hayvan deneylerinden elde edilen bulguları potansiyel insan klinik tedavisine sorunsuz bir şekilde bağlayarak umut verici bir translasyonel araştırma yolu sunar17,18. Bu insan merkezli in vitro tahliller, farmakolojik toksisiteyi değerlendirmek, hassas ilaç taramasını sağlamak ve yenilikçi hücre bazlı terapötik stratejilere yönelik araştırmaları ilerletmek için güvenilir bir platform görevi görür19,20. iPSC nöronal modelinin önemli rolünü kabul ederek, bu protokol çalışmasının üçüncü modülünü, türetilmiş ağlarının fonksiyonel özelliklerini kapsamlı bir şekilde araştırmak ve ilişkili hücre kültürü protokollerine ince ayar yapmak için ayırdık.
Bu elektrojenik nöral modüller, kalsiyum (Ca2 + görüntüleme), yama kelepçe kayıtları ve düşük yoğunluklu mikroelektrot dizileri (LD-MEA) gibi teknikler kullanılarak yaygın olarak incelenmiştir. Ca2+ görüntüleme, tek hücreli aktivite haritalaması sunarken, düşük zamansal çözünürlüğü ve uzun süreli kayıtlardaki zorluklar nedeniyle engellenen hücre etiketleme tabanlı bir yöntemdir. LD-MEA’lar uzamsal hassasiyetten yoksunken, invaziv tek bölgeli bir teknik olan ve zahmetli olan yama klempi genellikle düşük bir başarı oranısağlar 21,22,23. Bu zorlukların üstesinden gelmek ve ağ çapında aktiviteyi etkili bir şekilde araştırmak için, büyük ölçekli eşzamanlı nöral kayıtlar, beyin karmaşıklığının altında yatan nöral dinamiklerin hesaplama ilkelerini ve bunların sağlık ve hastalık üzerindeki etkilerini anlamak için çok önemli bir yaklaşım olarak ortaya çıkmıştır24,25.
Bu JoVE protokolünde, daha önce grubumuz ve diğer meslektaşlarımız tarafından bildirilen ex-vivo fare beyni akut dilimlerinden hipokampal ve koku soğanı devreleri (Şekil 1A-C) ve in vitro insan iPSC türevi nöronal ağlar (Şekil 1D-E) dahil olmak üzere çeşitli beyin modalitelerinde uzay-zamansal nöronal aktiviteyi yakalamak için yüksek yoğunluklu MEA’ya (HD-MEA) dayalı büyük ölçekli bir nöral kayıt yöntemi gösteriyoruz26,27,28,29,30,31,32,33,34,35. Tamamlayıcı metal oksit yarı iletken (CMOS) teknolojisi üzerine inşa edilen HD-MEA, 7 mm2 dizi boyutu36’da milisaniyenin altında kayıtlara izin veren çip üzerinde devre ve amplifikasyona sahiptir. Bu non-invaziv yaklaşım, yüksek uzay-zamansal çözünürlükte 4096 mikroelektrot kullanarak aynı anda binlerce nöronal topluluktan çok bölgeli, etiketsiz hücre dışı ateşleme modellerini yakalar ve yerel alan potansiyellerinin (LFP’ler) ve çok birimli spiking aktivitesinin (MUA) karmaşık dinamiklerini ortaya çıkarır26,29.
Bu metodoloji tarafından üretilen verilerin genişliği göz önüne alındığında, sofistike bir analitik çerçeve gereklidir, ancak zorluklar ortaya çıkarmaktadır37. Otomatik olay algılama, sınıflandırma, grafik teorisi, makine öğrenimi ve diğer gelişmiş teknikleri kapsayan hesaplama araçları geliştirdik (Şekil 1F)26,29,38,39. HD-MEA’yı bu analitik araçlarla entegre ederek, çeşitli nöral modaliteler arasında bireysel hücre gruplarından daha geniş sinir ağlarına kadar karmaşık dinamikleri araştırmak için bütünsel bir yaklaşım tasarlanmıştır. Bu birleşik yaklaşım, normal beyin fonksiyonlarındaki hesaplama dinamiklerini kavrayışımızı derinleştirir ve patolojik durumlarda mevcut olan anomaliler hakkında fikir verir28. Ayrıca, bu yaklaşımdan elde edilen içgörüler, beyinden ilham alan modelleme, nöromorfik hesaplama ve sinirsel öğrenme algoritmalarındaki ilerlemeleri hızlandırabilir. Sonuç olarak, bu yöntem, sinir ağı bozulmalarının arkasındaki temel mekanizmaları ortaya çıkarmada, potansiyel olarak biyobelirteçleri tanımlamada ve nörolojik durumlar için kesin teşhis araçlarının ve hedefe yönelik tedavilerin oluşturulmasına rehberlik etmede umut vaat ediyor.
Birbirine bağlı nöronal topluluklardan ortaya çıkan uzay-zamansal nöronal aktivitenin karmaşık dinamikleri, sinirbilimde uzun zamandır bir entrika konusu olmuştur. Patch-clamp, standart MEA ve Ca2+ görüntüleme gibi geleneksel metodolojiler, beyin karmaşıklığı hakkında değerli bilgiler sağlamıştır. Bununla birlikte, kapsamlı ağ çapında hesaplama dinamikleriniyakalamada genellikle yetersiz kalırlar 21,22,23. Bu JoVE çalışmasında ayrıntılı olarak açıklandığı gibi, HD-MEA platformunun teknik protokolü, hücre düzeneklerinden geniş ağlara (yani, akut, ex-vivo fare beyin dilimleri ve in vitro insan iPSC ağları) kadar çeşitli modalitelerde nöral dinamiklerin panoramik bir görünümünü sunarak ileriye doğru önemli bir sıçramayı temsil eder26,29,30,32.
Akut, ex-vivo fare beyin dilimleri, moleküler ve devre düzeyinde araştırmaları kolaylaştıran, nöronal araştırmalarda temel bir araç olmuştur 6,7. Bununla birlikte, doku canlılığını korumanın zorluğu kalıcı bir darboğaz olmuştur. Bu çalışmada açıklanan protokol, HD-MEA platformundaki faydalarından yararlanmak için bu dilimlerin kalitesini ve uzun ömürlülüğünü optimize etmek için kritik değişiklikler getirmektedir. Bu protokol aşağıdakilerin önemini vurgulamaktadır: – i) Daha uzun dilimleme sürelerinden ödün verilmesine rağmen, hassasiyeti ve en aza indirilmiş doku hasarı nedeniyle bir doku kıyıcı yerine vibratom kullanımının tercih edildiği dilim homojenliğinin elde edilmesi. ii) Doku canlılığını korumak için ekstraksiyondan kayda kadar süreç boyunca sürekli karbojenasyonun sağlanması. iii) Sıcaklığın düzenlenmesi ve kayıttan önce yeterli iyileşme süresine izin verilmesi. iv) Beyni stabilize etmek, yırtılmayı önlemek ve tutkal temasını en aza indirmek için bir agaroz blok veya küf kullanmak. v) Ayrışma, gürültü ve kayma gibi sorunlardan kaçınırken dilim sağlığını sağlamak için HD-MEA rezervuarı içinde karbojene aCSF’nin optimum akış hızlarını korumak (Tablo 2).
Hem fare beyni dilimleri hem de insan iPSC preparatları için, elektrot-doku arayüz bağlantısının arttırılması çok önemlidir 30,46,47. Protokolümüz, yapışmayı teşvik edici molekül Poli-dl-ornitin (PDLO) kullanmanın önemini vurgulamaktadır. Bu molekül sadece elektrik sinyallerini algılamak için yüzey alanını genişletmekle kalmaz, aynı zamanda elektriksel iletkenliğide artırır 46. Bunu yaparak, hücresel yapışmayı, büyümeyi ve fonksiyonel ağ özelliklerinin gelişimini destekler. Bu tür bir optimizasyon, HD-MEA platformunun etkinliğini artırmada çok önemli bir rol oynar. Bu da, mikro ölçekli ex-vivo ve in-vitro konektomların ve bunların uzay-zamansal ateşleme dizilerinin doğru ve tutarlı analizini sağlar. Özellikle, PDLO’nun, nöronal kültürlerde spontan ateşleme aktivitesini ve elektriksel uyaranlara duyarlılığı teşvik etmede polietilenimin (PEI) ve poli-l-ornitin (PLO) gibi diğer substratlardan daha iyi performans gösterdiği gösterilmiştir. Ek olarak, PDLO, HD-MEA’da yüzey işlevselleştirmesi için kullanılmıştır ve elektrot-dilim birleştirme arayüzünü geliştirdiği ve hem OB hem de HC dilimlerinde sinyal-gürültü oranını arttırdığıgösterilmiştir 26,29. Özel yapım bir platin ankrajın eklenmesi, elektrot-dilim arayüz bağlantısını daha da güçlendirerek daha yüksek sinyal-gürültü oranına sahip kayıtlara yol açar.
HD-MEA’nın hem ex-vivo fare beyin dilimleri hem de in vitro insan iPSC ağları için kullanılması, kapsamlı, çok ölçekli ve çok modlu dinamikleri keşfetmede usta bir yöntem sunar. Ancak bu yenilikçi yaklaşım, özellikle veri yönetiminde önemli zorlukları beraberinde getirmektedir 48,49,50,51. 18 kHz/elektrot örnekleme frekansında elde edilen tek bir HD-MEA kaydı, şaşırtıcı bir şekilde 155 MB/sn veri üretir. Birden fazla dilimi, çeşitli farmakolojik koşulları veya uzun kayıt sürelerini hesaba katarken veri hacmi hızla artar. Böyle bir bilgi akışı, kolaylaştırılmış işleme için sağlam depolama altyapıları ve gelişmiş hesaplama araçları gerektirir. HD-MEA platformunun binlerce nöronal topluluktan aynı anda veri toplama yeteneği hem bir nimet hem de bir engeldir. Beyin fonksiyonlarının hesaplama dinamikleri hakkında üstün bilgiler sağlar, ancak aynı zamanda rafine bir analitik çerçeve gerektirir. Bu JoVE protokolünde, büyük ölçekli olay algılama, sınıflandırma, grafik teorisi, frekans analizi ve makine öğrenimi dahil olmak üzere hesaplama stratejilerine örnekler sağladık. Bu yöntemler, karmaşık nöral verileri analiz etmenin zorluklarının üstesinden gelmek için gösterilen yoğun çabaların altını çizmektedir. Bununla birlikte, bu çok boyutlu nöral veri kümelerini analiz etmek için daha gelişmiş hesaplama araçlarının geliştirilmesi için hala önemli bir alan var. Uygun araçlar ve metodolojilerle donanmış olan HD-MEA platformunun potansiyeli, hem sağlıklı hem de patolojik koşullarda beyin fonksiyonlarının incelikleri hakkında derin bilgiler sunarak büyütülür.
Özünde, HD-MEA platformu, tartışılan ayrıntılı protokoller ve hesaplama araçlarıyla entegre edildiğinde, beynin karmaşık işleyişini anlamak için dönüştürücü bir yaklaşım sunar. Büyük ölçekli, çok ölçekli ve çok modlu dinamikleri yakalayarak öğrenme, bellek ve bilgi işleme gibi süreçlere ilişkin paha biçilmez içgörüler sağlar. Ayrıca, in vitro insan iPSC ağlarındaki uygulaması, ilaç taraması ve kişiselleştirilmiş tıpta devrim yaratma potansiyeline sahiptir. Bununla birlikte, bu platform sinirbilim araştırmalarında önemli bir ilerlemeyi temsil etse de, doğasında var olan teknik zorlukları kabul etmek ve ele almak çok önemlidir. Devam eden iyileştirme ve gelişmiş hesaplama araçlarının entegrasyonu ile HD-MEA platformu, hassas teşhis araçları, spesifik biyobelirteçlerin tanımlanması ve nörolojik bozukluklar için hedefe yönelik tedaviler konusunda yeni bir çağı başlatmaya hazırlanıyor.
The authors have nothing to disclose.
Bu çalışma kurumsal fonlar (DZNE), Helmholtz Doğrulama Fonu (HVF-0102) bünyesindeki Helmholtz Derneği ve Dresden Uluslararası Biyotıp ve Biyomühendislik Enstitüsü (DIGS-BB) tarafından desteklenmiştir. Ayrıca DZNE-Dresden’deki davranışsal hayvan testleri platformuna (Alexander Garthe, Anne Karasinsky, Sandra Günther ve Jens Bergmann) destekleri için teşekkür ederiz. Şekil 1’in bir kısmının BioRender.com platformu kullanılarak oluşturulduğunu kabul etmek isteriz.
150 mm Glass Petri Dish | generic | generic | Brain Preparation Workspace, Brain Slice Recording Workspace |
0.22 μm Sterile Filter Unit | Assorted | Assorted | Assorted |
90 mm Plastic Culture Dish | TPP | 93100 | Brain Preparation Workspace, Brain Slice Recording Workspace |
Agarose | Roth | 6351.5 | Brain Preparation Workspace |
Agarose Mold | CUSTOM | CUSTOM | Brain Preparation Workspace; Custom designed 3D Printer Design, available upon request |
Aluminum Foil | generic | generic | Brain Extraction Workspace |
Anesthesia chamber | generic | generic | Brain Extraction Workspace; Assorted Beaker, Bedding etc |
Ascorbic Acid | Sigma Aldrich | A4544-25G | Solution Preparation Workspace |
Assorted Beakers | generic | generic | Solution Preparation Workspace; 50 mL |
Assorted Luers | Cole Parmer | 45511-00 | Brain Slice Recording Workspace |
Assorted Volumetric flasks | generic | generic | Solution Preparation Workspace; 500 mL, 1 L |
B27 Supplement | Life Technologies | 17504-044 | BrainXell Commercial Supplier Protocol |
BDNF | Peprotech | 450-02 | BrainXell Commercial Supplier Protocol |
Biological Safety Cabinet with UV Lamp | Assorted | Assorted | HD-MEA Coating, Plating, Mainainance Workspace |
BrainPhys Neuronal Medium | STEMCELL Technologies | 05790 | CDI, and BrainXell Commerical Supplier Protocol |
Brainwave Software | 3Brain AG | Version 4 | Brain Slice and Human iPSC Recording Workspace |
BrainXell Glutamatergic Neuron Assay | BrainXell | BX-0300 | BrainXell Commercial Supplier Protocol |
CaCl2 | Sigma Aldrich | 21115-100ML | Solution Preparation Workspace |
Carbogen | generic | generic | All Workspaces; 95%/5% O2 and CO2 mixture |
Cell Culture Incubator | Assorted | Assorted | Assorted |
CMOS-based HD-MEA chip | 3Brain AG | CUSTOM | Brain Slice and Human iPSC Recording Workspace |
Conical Tubes, 50 mL, Falcon (Centrifuge Tubes) | STEMCELL Technologies | 38010 | CDI Commerical Supplier Protocol |
Crocodile Clip Grounding Cables | JWQIDI | B06WGZG17W | Brain Slice Recording Workspace |
Curved Forceps | FST | 11052-10 | Brain Extraction Workspace |
DMEM/F12 Medium | Life Technologies | 11330-032 | BrainXell Commercial Supplier Protocol |
Dulbecco’s Phosphate Buffered Saline without Ca2+ and Mg2+ (D-PBS) | STEMCELL Technologies | 37350 | CDI Commerical Supplier Protocol |
Filter Paper | Macherey-Nagel | 531 011 | Brain Preparation Workspace |
Fine Brush | Leonhardy | 773 | Brain Slice Preparation Workspace, Brain Slice Recording Workspace |
Forceps | VITLAB | 67895 | Brain Slice Recording Workspace |
GDNF | Peprotech | 450-10 | BrainXell Commercial Supplier Protocol |
Geltrex | Life Technologies | A1413201 | BrainXell Commercial Supplier Protocol |
Glass pasteur pipette | Roth | 4518 | Brain Slice Preparation Workspace, Brain Slice Recording Workspace |
Glucose | Sigma Aldrich | G7021-1KG | Solution Preparation Workspace |
GlutaMAX | Life Technologies | 35050-061 | BrainXell Commercial Supplier Protocol |
Gravity-based Perfusion System | ALA | VC3-8xG | Brain Slice Recording Workspace |
HD-MEA Recording platform | 3Brain AG | CUSTOM | Brain Slice and Human iPSC Recording Workspace |
Heater | Warner Instruments | TC-324C | Brain Slice Recording Workspace |
Hemocytometer or Automated Cell Counter | Assorted | Assorted | HD-MEA Coating, Plating, Mainainance Workspace |
Hypo Needles | Warner Instruments | 641489 | Brain Slice Recording Workspace |
iCell GlutaNeurons Kit, 01279 | CDI | R1061 | CDI Commerical Supplier Protocol |
Iris Scissors | Vantage | V95-304 | Brain Extraction Workspace |
Isoflurane | Baxter | HDG9623 | Brain Extraction Workspace |
KCl | Sigma Aldrich | P5405-250G | Solution Preparation Workspace |
Laminin | Sigma-Aldrich | L2020 | CDI Commerical Supplier Protocol |
Liquid Nitrogen Storage Unit | Assorted | Assorted | HD-MEA Coating, Plating, Mainainance Workspace |
Magnetic Stirrer | generic | generic | Solution Preparation Workspace |
Metal Screws | Thorlabs | HW-KIT2/M | Brain Slice Recording Workspace |
MgCl2 | Sigma Aldrich | M1028-100ML | Solution Preparation Workspace |
MgSO4 | Sigma Aldrich | 63138-250G | Solution Preparation Workspace |
Microdissection Tool Holder | Braun | 4606108V | Brain Slice Preparation Workspace, Brain Slice Recording Workspace |
Microdissection Tool Needle | Braun | 9186166 | Brain Slice Preparation Workspace, Brain Slice Recording Workspace |
Modular Stereomicroscope | Leica | CUSTOM | Brain Slice Recording Workspace; custom specifications and modifications |
N2 Supplement | Life Technologies | 17502-048 | CDI, and BrainXell Commercial Supplier Protocol |
NaCl | Sigma Aldrich | S3014-1KG | Solution Preparation Workspace |
NaH2PO4 | Sigma Aldrich | S0751-100G | Solution Preparation Workspace |
NaHCO3 | Sigma Aldrich | S5761-500G | Solution Preparation Workspace |
Neurobasal Medium | Life Technologies | 21103-049 | BrainXell Commercial Supplier Protocol |
Optical Cage System | Thorlabs | Assorted | Brain Slice Recording Workspace |
Optical Table w/Breadboard | Thorlabs | SDA7590 | Brain Slice Recording Workspace |
PDLO | Sigma Aldrich | P0671 | HD-MEA Coating, Brain Slice Recording Workspace |
Penicillin-streptomycin, 100x | Thermo Fisher Scientific | 15140-122 | CDI Commerical Supplier Protocol |
Pipette tips | TipONE | S1120-8810 | Brain Slice Recording Workspace |
Pipettors | Assorted | Assorted | Assorted |
Platinum Anchor | CUSTOM | CUSTOM | Brain Slice Recording Workspace |
Polyethylene Tubing | Assorted | Assorted | Brain Slice Recording Workspace |
Pump | MasterFlex | 78018-22 | Brain Slice Recording Workspace |
Razor Blade | Apollo | 10179960 | Brain Preparation Workspace |
Reference Electrode Cell Culture Cap | CUSTOM | CUSTOM | Human iPSC Recording Workspace; Custom designed 3D Printer Design, available upon request |
Rubber Pipette Bulb | Duran Wheaton Kimble | 292000205 | Brain Slice Preparation Workspace, Brain Slice Recording Workspace |
Serological Pipettes, 1 mL, 2 mL, 5 mL, 10 mL, 25 mL | Assorted | Assorted | Assorted |
Slice Recovery Chamber | CUSTOM | CUSTOM | Brain Slice Recovery Workspace; Custom designed 3D Printer Design, available upon request |
Spatula | ISOLAB | 047.06.150 | Brain Preparation Workspace |
Sucrose | Sigma Aldrich | 84100-1KG | Solution Preparation Workspace |
Super Glue | UHU | 358221 | Brain Slice Preparation Workspace |
Surgical Scissors | Peters Instruments | BC 344 | Brain Extraction Workspace |
Tabletop Centrifuge | Assorted | Assorted | Assorted |
TGF-β1 | Peprotech | 100-21C | BrainXell Commercial Supplier Protocol |
Tissue Paper | generic | generic | Brain Extraction Workspace |
Trypan Blue | STEMCELL Technologies | 07050 | CDI Commerical Supplier Protocol |
Upright Microscope | Olympus | CUSTOM | Imaging Workspace; Custom specifications and modifications |
Vacusip | Integra | 159010 | Brain Slice Recording Workspace |
Vibratome | Leica | VT1200s | Brain Slice Preparation Workspace; Includes: Specimen plate, buffer tray, ice tray, specimen plate holding tool, vibratome blade adjusting tool |
Vibratome Blade | Personna | N/A | Brain Slice Preparation Workspace |
Water Bath | Lauda | L000595 | Brain Slice Recovery Workspace |