Contrast Imaging in muis embryo's met behulp van hoge-frequentie Ultrasound

Contrastversterkte echografie maakt gebruik van microbellen contrastmiddelen te visualiseren en te karakteriseren de vasculaire milieu. Deze agenten in staat stellen niet-invasieve evaluatie van de microcirculatie, vasculariteit en cardiovasculaire functie. Bovendien kan modificatie van het oppervlak bel leiden gerichte microbellen binden aan endotheel biomarkers, zoals aangetoond in preklinische toepassingen van angiogenese, atherosclerose en ontsteking ^1,2 waardoor moleculaire ultrasone beeldvorming van vasculaire voorvallen mogelijk. Contrastechografie ultrageluid kan derhalve worden gebruikt om de complexe en diverse omgevingen die invloed gezonde en zieke bloedvaten toestanden ^3-5 identificeren.

In de afgelopen aantal jaren is de belangstelling voor het nut van microbellen beeldvorming uitgebreid tot de veelzijdige muis embryo model. Als een model van de ontwikkeling van zoogdieren, introductie van microbellen in de embryonale vaatstelsel verbetert fysiologischestudie van de ontwikkeling bloedsomloop (bijvoorbeeld bloedstroom, hartminuutvolume) en in geval van transgene en gerichte mutant muismodellen van hartziekte ^6,7, kan informatie krijgen over hoe genetische factoren veranderen cardiovasculaire functie. In feite, kwantitatieve en kwalitatieve analyses van 2D embryonale hersenen vasculatuur al bereikt ^8. Bovendien, de muis embryo presenteert als een uitstekend model voor het onderzoeken van de binding van gerichte microbellen vasculaire markers in vivo. Bartelle et al. ^9, bijvoorbeeld, hebben avidine microbellen geïntroduceerd in embryo cardiale ventrikels om gerichte binding beoordelen Biotag-BirA transgene embryo's en onderzoeken vasculaire anatomie. Het genereren van heterozygote en homozygote muismodellen kunnen ook worden gebruikt als een surrogaat voor tumormodel studies gericht op de kwantitatieve aard van moleculaire ultrageluid bepalen – een belangrijke benchmark vertaling van deze techniek om de kliniek.

<p class = "jove_content"> Microbelletjes worden het vaakst ingevoerd om de embryonale circulatie via intra-cardiale injecties in enkele embryo's blootgesteld via een laparotomie ^8-10. In utero injecties worden echter geconfronteerd met een aantal uitdagingen. Deze omvatten injectie begeleiding, de noodzaak om de beweging in de moeder en geëxterioriseerde embryo tegen te gaan, het onderhoud van hemodynamische levensvatbaarheid bij de moeder en exteriorized embryo's, het aanpakken van de lange-termijn effecten van anesthesie en complicaties als gevolg van bloedingen ^11. Daarom is het doel van het onderzoek was een techniek voor het injecteren van microbelletjes in geïsoleerde levende laat-stadium embryo ¹² ontwikkelen. Deze optie biedt meer vrijheid in termen van injectie controle en positionering, reproduceerbaarheid van het beeldvlak zonder obstructie, en vereenvoudigde beeldanalyse en kwantificering.

In de huidige studie, schetsen we een nieuwe procedure voor de injectie van microbellen in levende muizen embryo's for de toepassing van het bestuderen van microbellen kinetisch gedrag en van het bestuderen van gerichte microbellen binden aan endogene endotheeloppervlak markers. Niet-lineaire contrast specifieke echografie wordt gebruikt voor het meten van een aantal basis perfusieparameters inclusief piekverhogingsfactor (PE), wassen-in en de tijd tot piek (TTP) in geïsoleerde E17.5 embryo's. We tonen ook de geldigheid van de embryo voor de beoordeling van de kwantitatieve aard van moleculaire ultrageluid in een embryonale endoglin functieverlies transgeen muismodel, waarbij endoglin een klinisch relevant doel vanwege de hoge expressie in vasculaire endotheelcellen op plaatsen van actieve angiogenese ¹³ . De hechting van-endogline gerichte (MB _E), rat isotype IgG _{2 controlepunten} (MB _C) en ongerichte (MB _U) microbellen wordt geëvalueerd in heterozygote endoglin (Eng ^+/-) en homozygote endoglin (Eng ^{+ / +)} uiten van embryo's. Analyse van de gerichte binding blijkt dat moleculaire echografie te maken tussen genotypen en endoglin betrekking receptor dichtheden meetbare moleculaire ultrageluid niveaus.