测试<em>果蝇</em>用Y型迷宫测定嗅觉
概要
我们提出了一个选择的测试揭示使用Y型迷宫试验对果蝇行为的气味的影响。
Abstract
从环境探测信号是必不可少的动物，以确保其生存。为了这个目标，他们使用环境线索，如视觉，mechanoreception，听觉和味觉，通过chemoperception，通过直接接触或通过嗅觉，它代表了响应于作用在较长的范围内挥发性分子。挥发性的化学分子是大多数动物非常重要的信号，在危险，食物来源，或个人之间进行通信的检测。 果蝇是最常见的生物模型，科学家探索嗅觉的细胞和分子基础之一。为了突出这种小虫子的嗅觉能力，我们描述的基础上，Y型迷宫测试小鼠用经典修改选择的协议。用Y型迷宫获得的数据提供有价值的信息，以更好地了解动物如何处理他们不断变化着的环境。我们引入了一个一步一步的协议研究增味剂的使用这个Y型迷宫试验探索动态响应的影响。
Introduction
通过味觉或嗅觉化学感受是一个关键的感官方式对动物的生存。它给社会互动所需的危险或食物来源的检测重要线索，以及。它还可以帮助动物找到它们的繁殖需要一个性伴侣。对于超过20年，深入的研究，其中包括诺贝尔文学奖获奖作品由理查德·阿克塞尔和琳达·巴克在2004年“对气味受体和嗅觉系统的组织他们的发现”，已经进行了揭示的分子和细胞基地嗅觉1,2。
其中一个最喜欢的动物模型，科学家解剖嗅觉感知是D。果蝇 。这种昆虫股与哺乳动物类似的细胞和分子的气味编码策略。科学界采用不同的行为范式，研究的气味在这个果蝇的作用。这些测试包括多模态试验，如courtship测试，其中各种感觉方式，包括嗅觉，是重要的诱发雄性求偶3。其它测定法也已经被开发，以更具体的处理的加臭剂的作用;这些包括T型迷宫，Y型迷宫，陷阱检测，四场舞台和风力隧道4,5,6,7,8。
在这篇文章中，我们提出一个简单的改性Y型迷宫试验，其中使用D.提供强大的嗅觉反应果蝇 。我们的设置使用终端提示中违背先前描述的方法9。因此，我们的Y型迷宫有两个好处。首先，它避免了系统中任何的回报，一旦苍蝇作出了她的选择。第二，它限制的气味在Y型迷宫的各个领域的交流。这最后的优点是重要的，因为果蝇是被经常使用，以避免加臭剂的饱和空气流非常敏感。以调整实验装置与空气流动将是时间和成本消耗。因此，我们的Y型迷宫试验表示EFficient和快速的方法来测试果蝇的嗅觉表现。
Protocol
Representative Results
Discussion
我们的Y-迷宫协议是基于一个先前描述的方案9。然而，我们引入两个主要区别。首先，我们使用窄的枪头，以防止苍蝇返回一旦他们决定在含有溶剂或溶剂加臭剂小瓶进入。这些窄的尖端也是有用的，以限制在Y-迷宫的加臭剂的扩散。其次，我们使用一个较小的负载小瓶强制苍蝇在Y-迷宫进入。有这些苍蝇的高参与重要的是（24小时后80％至100％; SIMONNET，个人通讯）。
…
開示
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
我们感谢4匿名审稿人的工作，提高了稿件。我们感谢中心法国国家科学研究因为它有MBG和YG的财政支持，以及大学德勃艮第和法国研究部彩信。研究YG实验室是由欧洲研究委员会（ERC开始格兰特，GliSFCo-311403）中，法新社国立德拉RECHERCHE（ANR-JCJC，GGCB-2010），行政法院地区的勃艮第（麦嘉华）和法国国家科学研究中心资助。
Materials
| Drosophila Polystyrene tube | VWR europe | 734-2255 | 30 x 25 mm Y-maze |
| Drosophila Borosilicate tube | Dijon verre | 95 X 25 mm Y-maze |
|
| Foam stopper | Dutscher | 999038 | Y-maze |
| Y-shaped connector | Europrix | 11020605 | Y-maze |
| 100-1000µl pipet tips | Corning | 4868 | Join the following pipet tips to the Y-shaped connector. Cut 2 pipet tips at 65 mm from the wide end, and connect the narrow end (with a ∼2 mm opening) to 2 test vials. These openings will limit the U-turns once the flies enter the tubes containing the odors. Cut 1 pipet tip at 35 mm from the wide end, and connect it to the loading vial. Y-maze |
| Far-Red LED Bulb | Rubin-Lacaque | 0RB180238 | 625-630 nm |
| Acetic Acid | Sigma-Aldrich | 45725 | |
| Phenylacetic Acid | Sigma-Aldrich | P16621 | |
| Yeast | Sensient Flavors Strasbourg | 1018880464 | |
| Cornmeal | eurogerm | Farine de maïs | |
| Agar | Kalys | HP-697-25 | |
| Methyl hydroxy 4 benzoate | VWR international | 25605293 |
参考文献
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