만성 EAE와 마우스의 신경 줄기 / 전구 세포의 전신 주입

강력한 증거 CNS 장애 ^1-8의 동물 모델에서 체세포 신경 줄기 / 전구 세포 (NPC가)의 이식의 치료 효능을 입증 생체 내 연구에서 생겨났다. 이러한 실험 결과는 임상 응용 프로그램으로 변환하기 전에 그럼에도 불구하고, 호스트에 줄기 세포의 전달과 관련된 문제의 수는 신중한 검토가 필요합니다. 다 초점, 만성 염증성 뇌 질환 (nonhematopoietic) 원기를 회복시키는 줄기 세포 치료의 발전으로 특히 상당한 장애물은 NPC 주입의 최적 경로를 식별합니다. 대상 질병의 병태 생리의 확고한 이해 (초점 또는 다 초점, 기본 염증 또는 기본 퇴행성) 및 전달 기술과 관련된 가능성과 위험 문제의 신중한 분석은 줄기 세포 전달을위한 최적의 프로토콜을 식별합니다.

동안 초점 ( <em> 예. 신경계의 실질에) 줄기 세포 이식 손상의 공간적으로 밀폐 된 공간을 특징으로 중추 신경계 질환의 치료에 대한 논리적 인 접근 방식 (예를 들면 파킨슨 병과 헌팅턴의 질병, 뇌와 척수 외상성 손상, 뇌졸중), 바로 그 방법을 증명할 수 예, 다 초점 만성, 공간적으로 전파 CNS 손상은 시간이 지남에 축적 MS, 같은 조건에서 실질적으로 가능하지합니다. 후자의 경우, 각각의 병변에 초점 세포 주사를 대상으로는 따라서 적게 침략 NPC 이식 타겟팅 CNS의 대안, 더 적절한 방법의 식별을 자극 CNS 실질 내 긴 거리를 통해 마이그레이션하는 이식의 NPC의 제한된 용량에 의해 방해된다 .

CNS9 외부 혈관 내 주입했을 때 큰 약속은 생쥐의 NPC가 두개 내 종양 (예를 들면. 신경 교종)을 대상으로 관찰에서 나왔다. 이 정액 다음줄기 세포 pathotrophism ^10의 생체 증거, 광범위한 데이터는 실험자가 면역 뇌척수염 (EAE)와 동물 실험의 가능성과의 NPC의 조직 이식의 치료 효과에 관한 축적 된 정맥 중 하나를 통해 염증 CNS 손상의 모델로 (IV) 또는 뇌 실내 (ICV). NPC 주입 ^{1,2,5,6,8 ..} 우리는 먼저이 대상을 입력 염증 CNS를, 이후 여러 세포 간 결합에 이식의 NPC의 능력에 의존하는 것으로 나타났습니다 생체 ^(11)의 특정 미세 환경 내에서 통신 프로그램. 특히 CNS를 대상으로하기 위해,의 NPC는 뇌척수액 (CSF) ICV 주입에 의한 순환, 또는 정맥 주사를 통해 혈류로 직접 전달됩니다. 일단 혈류 또는 CSF 중 하나를 입력, 이식의 NPC가 적극적으로 상호 작용혈액 뇌 (BBB)​​ 또는 혈액 뇌척수액 (BCSFB) 장애 및 중추 신경계의 실질을 입력합니다. NPC 이식하고 BBB (또는 BCSFB) 사이의 상호 작용은 NPC의 표면에 세포 부착 분자 (CAM들)의 특정 설정에 의해 규제 및 활성화 내피 / 뇌실막 세포 ^12-14에 CAM 카운터 – 리간드의 높은 수준의 발현에 의해 촉진된다. 이러한 캠 예는 히알루 론산에 대한 수용체, CD44, 및 세포 간 접착 분자 (ICAM) -1 리간드 늦게 항원 (VLA) -4 ^5,15,16 (즉, 백혈구의 활성화 뇌실막과의 상호 작용의 책임을 포함 내피 세포), 그리고 훨씬 낮은 정도의 림프구 기능 관련 항원 (LFA) -1 P-셀렉틴 당 단백질의 리간드 (PSGL) -1. NPC들도 CCR1, CCR2, CCR5, CXCR3 및 CXCR4 등의 케모카인 수용체의 넓은 범위를 표현하는 (그러나 CCR3 및 CCR7을 표명하지 아니합니다) 시험 관내 및 생체 ^5,16 모두 기능적으로 활성화되어있는. 따라서, systemica베드로 주입의 NPC는 염증 CNS의 수준에 축적, G-단백질 결합 수용체 (GPCR에)와 함께,이 캠 사용합니다. 반대로, NPC의 혈관이나 뇌척수액 공간 루트 ^2를 통해 CNS를 입력하지 않은 건강한 생쥐에 체계적으로 주입했다. 화학적으로 유도 된 뇌염의 모델로 조직의 사이토 카인 또는 lypopolisaccharide (LPS) 주입 다음 CNS의 염증, 또는 내피 / 뇌실막 세포 활성화는 뇌와 척수 ^2에 체계적으로 주입의 NPC의 축적을위한 필요가있다. 따라서, 조직 NPC 치료와 CNS의 성공 타겟팅은 뇌와 척수 환경이 축적의 NPC의 내피 마이그레이션에 도움이되는 기회 (우)의 질병 특정 윈도우의 식별에 따라 달라집니다. 이러한 조건은 일반적으로 급성 및 아 급성 염증 ^(17)의 상황에서 발생한다. 일단 미분화의 NPC를 이식, CNS를 입력 한마우스의 clinico 병리학 기능뿐만 아니라 EAE와 큰, 인간이 아닌 영장류를 개선하는 것으로 나타났다. 이 질문에 답변 최소한의 세포 교체 ² 및 비 CNS 염증 영역 ^{(19, 20)} (예를 들어, 림프절) 대 혈관 주위 CNS ^2,5,6,18 내 면역 조절 및 신경 주변 분비 인자의 놀라운 분비에서 의존하는 기술되었다 염증 세포의 신호는 면역 세포에게 ^{5 침투에} 의해 유발.

여기에서 우리는 만성 EAE의 마우스 모델에 체세포의 NPC의 전신 주사의 주요 방법 론적 측면을 설명합니다. 보다 구체적으로, 우리는 확장 및 성인 C57BL / 6 마​​우스의 subventricular 영역 (SVZ)에서 이식 체세포의 NPC를 준비, 우리는 (I)로 설정 한 프로토콜을 도출 정의; (II)는 마우스의 만성 EAE를 유도 그리고 (iii) 치료 효과가 전신 (IV 또는 ICV) NPC 이식을 수행하는 전n을 EAE 마우스.