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Scambio idrogeno/deuterio basato sull'elettroforesi capillare per la caratterizzazione conformazionale di proteine con spettrometria di massa top-down
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05:45 min
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June 08, 2021
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Qui viene presentato un protocollo per un approccio di scambio idrogeno/deuterio (HDX) basato sull'elettroforesi capillare accoppiato con la spettrometria di massa top-down. Questo approccio caratterizza la differenza nelle strutture di ordine superiore tra diverse specie proteiche, comprese le proteine in diversi stati e diverse proteoforme, conducendo simultaneamente HDX differenziale e separazione elettroforetica.
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Capillary ElectrophoresisHydrogen/deuterium ExchangeConformational CharacterizationTop-down Mass SpectrometryProtein Species SeparationHigher-order StructureHDX-CE-MSElectrophoretic EffectPreconditioningUltrasonicationBackground ElectrolyteInfusion TubingNano-electrospray IonizationInjection Volume EstimationElectrophoretic Voltage
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Chaihu, L., Yao, X., Xu, X., Zhu, Z., Chen, D. D. Y., Wang, G. Capillary Electrophoresis-based Hydrogen/Deuterium Exchange for Conformational Characterization of Proteins with Top-down Mass Spectrometry. J. Vis. Exp. (172), e62672, doi:10.3791/62672 (2021).
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