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Introducción de mutaciones puntuales en células madre pluripotentes humanas mediante la edición perfecta del genoma
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Introducing Point Mutations into Human Pluripotent Stem Cells Using Seamless Genome Editing
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Introducción de mutaciones puntuales en células madre pluripotentes humanas mediante la edición perfecta del genoma

DOI:
10.3791/61152-v

•

09:03 min

•

May 10, 2020

•

, ,
1MRC Centre for Regenerative Medicine,University of Edinburgh

Capitoli

  • 00:05Introduction
  • 00:40Gene Editing of Human Pluripotent Stem Cells
  • 06:57Results: Genetic Editing in Human Pluripotent Stem Cells
  • 08:06Conclusion

Summary

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Aquí, describimos un método detallado para la edición de genes sin fisuras en células madre pluripotentes humanas utilizando un plásmido donante basado en piggyBac y el mutante de nickasa Cas9. Se introdujeron dos mutaciones puntuales en el exón 8 del locus alfa del factor nuclear 4 de hepatocitos (HNF4α) en células madre embrionarias humanas (hESCs).

Tags

Human Pluripotent Stem CellsGenome EditingCRISPR-Cas9Seamless Genome EditingTargeted Gene InsertionLaminin 521MTeSR1 MediumCell DissociationNucleofectionSingle Guide RNATargeting Vector

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