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Untersuchung der RNS-Synthese mit 5-Bromouridine Kennzeichnung und Immunopräzipitation
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Investigation of RNA Synthesis Using 5-Bromouridine Labelling and Immunoprecipitation
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Untersuchung der RNS-Synthese mit 5-Bromouridine Kennzeichnung und Immunopräzipitation

DOI:
10.3791/57056-v

•

09:59 min

•

May 03, 2018

•

, , , ,
1DANDRITE – Danish Research Institute of Translational Neuroscience, Dept. of Biomedicine,Aarhus University, 2Dept. of Molecular Biology and Genetics,Aarhus University

Capitoli

  • 00:04Titolo
  • 00:37RNA Sample Preparation
  • 02:37Immunoprecipitation Bead Preparation
  • 04:51Binding BrU-labelled RNA to Beads
  • 05:46RNA Elution Purification
  • 08:29Results: Increase in Steady State RNA Caused by Increase in RNA Synthesis
  • 09:35Conclusion

Summary

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Diese Methode kann verwendet werden, um RNS-Synthese zu messen. 5-Bromouridine Zellen hinzugefügt und synthetisierte RNA eingebaut. RNA-Synthese wird durch RNA-Extraktion unmittelbar nach der Kennzeichnung, gemessen, gefolgt von 5-Bromouridine-gezielte Immunopräzipitation gekennzeichneten RNA und Analyse durch reverse Transkription und quantitative Polymerase-Kettenreaktion.

Tags

RNA Synthesis5-bromouridine LabelingImmunoprecipitationHEK293T CellsRNA ExtractionMagnetic BeadsBromouridine-IP Buffer

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