Rivista
/
Genetica
/
Urval-beroende och oberoende generering av CRISPR / Cas9-medierade genknockouts i däggdjursceller
JoVE Journal
Genetica
È necessario avere un abbonamento a JoVE per visualizzare questo.  Accedi o inizia la tua prova gratuita.
JoVE Journal Genetica
Selection-dependent and Independent Generation of CRISPR/Cas9-mediated Gene Knockouts in Mammalian Cells
Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

Urval-beroende och oberoende generering av CRISPR / Cas9-medierade genknockouts i däggdjursceller

DOI:
10.3791/55903-v

•

11:35 min

•

June 16, 2017

•

, ,
1Cell Biology and Neuroscience,University of California, Riverside

Capitoli

  • 00:05Titolo
  • 00:57Transfection of CRISPER Component into Cultured Cells and Drug Selection
  • 02:31Isolation of Clonal Populations
  • 03:53Screening Candidates by Dot Blot
  • 06:30Screening Candidates by Colony PCR
  • 08:59Results: Knockout Cell Lines Generated by Two CRISPER/Cas9 Methods
  • 10:40Conclusion

Summary

Traduzione automatica

Traduzione automatica

Nya framsteg inom förmågan att genetiskt manipulera somatiska cellinjer har stor potential för grundläggande och tillämpad forskning. Här presenterar vi två tillvägagångssätt för CRISPR / Cas9 genererad knockoutproduktion och screening i däggdjurscellslinjer, med och utan användning av selekterbara markörer.

Tags

CRISPR/Cas9Gene KnockoutNonhomologous End JoiningHomology-directed RepairT-REx-293 CellsTransfectionDrug SelectionClonal Isolation

Article

Embed

AGGIUNGI ALLA PLAYLIST

Usage Statistics

Video correlati

Uppfödning och dubbelsträngade RNA-medierad Gene Knockdown i Hide Beetle,<em> Rävänger</em

Med hjälp av en fluorescerande PCR-kapillärgelelektrofores Technique att genotypa CRISPR / Cas9-medierad Knockout mutanter i en hög kapacitet Format

En standardmetod att undersöka Hotellets mutagenicitet som en funktion av punktmutation reparation katalyseras av CRISPR/Cas9 och SsODN i mänskliga celler

Generation av en gen-stört Streptococcus mutans stam utan genen kloning

CRISPR/Cas9-medierad riktade Integration In Vivo som använder en homologi-medierad slutet att gå-baserad strategi

Ett protokoll för produktionen av integras-brist Lentiviral vektorer för CRISPR/Cas9-medierad gen Knockout i delande celler

Effektiv produktion och identifiering av CRISPR/Cas9-genererade gen Knockouts i det modellsystem Danio rerio

Formaldehyd-assisted isolering av reglerande element till åtgärd kromatin tillgänglighet i däggdjursceller

Högeffektiva gen störningar av murina och mänskliga hematopoetiska stamceller av CRISPR/Cas9

Förberedelse och genmodifiering av Nonhuman Primate hematopoetiska stamceller och stamceller

Read Article