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General Laboratory Techniques
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JoVE Educazione Scientific General Laboratory Techniques
Histological Sample Preparation for Light Microscopy
  • 00:00Panoramica
  • 01:05Fixation of Tissue Samples
  • 04:19Embedding and Sectioning
  • 06:12Applications
  • 09:01Summary

Preparação de Amostras Histológicas para Microscopia de Luz

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Panoramica

Histologia é o estudo de células e tecidos, que normalmente é auxiliado pelo uso de um microscópio leve. A preparação de amostras histológicas pode variar muito de acordo com as propriedades inerentes das amostras, como tamanho e dureza, bem como o pós-processamento esperado, que inclui técnicas planejadas de coloração ou outras aplicações de fluxo baixo. Como descrito neste vídeo, a preparação do espécime normalmente começa com um procedimento de fixação para evitar a degradação da amostra por enzimas de ocorrência natural que são liberadas pelas células após a morte. Uma vez fixadas, as amostras são colocadas em um meio de incorporação capaz de suportar suficientemente a amostra. Mais comumente isso é cera de parafina, mas outros materiais como um meio de congelamento à base de glicerina e ágars também são usados para cercar a amostra durante a secção. A secção ocorre em um microtome ou outro dispositivo de corte que permite ao usuário raspar a amostra em fatias finas que variam de alguns mícrons a alguns milímetros de espessura. Uma vez cortadas, as seções são montadas em um slide de vidro e manchadas para trazer características específicas da amostra antes de serem imagens em um microscópio.

Procedura

Histologia é um termo que se refere ao estudo da anatomia microscópica de tecidos e células. A preparação adequada da amostra histológica para microscopia leve é essencial para obter resultados de qualidade a partir de amostras de tecido. Existem 3 passos principais comuns a quase todos os procedimentos histológicos. Primeiro, a amostra é fixa, a fim de preservar o tecido e retardar a degradação tecidual. Em seguida, a amostra é imersa em um material, ou incorporando mídia, que tem propriedades mecâni…

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JoVE Science Education Database. JoVE Science Education. Histological Sample Preparation for Light Microscopy. JoVE, Cambridge, MA, (2023).

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