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Quantitativa High-throughput cella singola test di citotossicità per le cellule T
JoVE Journal
Immunologia e infezioni
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JoVE Journal Immunologia e infezioni
Quantitative High-throughput Single-cell Cytotoxicity Assay For T Cells

Quantitativa High-throughput cella singola test di citotossicità per le cellule T

DOI:

09:28 min

February 02, 2013

, , , ,

Capitoli

  • 00:05Titolo
  • 01:32Fabrication of Arrays of Nanowells in PDMS
  • 02:14Target Cell (T) Labeling
  • 02:53Effector (E) Cell Labeling
  • 03:26Separation of Live and Dead Cells by Ficoll Density Gradient
  • 05:23Cell Loading onto Nanowell Array
  • 06:51Imaging
  • 07:58Results: A High-throughput Cytolytic Assay
  • 09:03Conclusion

Summary

Traduzione automatica

Descriviamo una singola cellula saggio ad alta prestazione per misurare la citotossicità delle cellule T quando incubati con cellule tumorali bersaglio. Questo metodo impiega una densa matrice elastomerica di sub-nanolitri pozzetti (~ 100.000 pozzetti / matrice) per confinare spazialmente le cellule T e le cellule bersaglio con rapporti definiti ed è accoppiato al microscopio a fluorescenza per monitorare effettore-bersaglio coniugazione e apoptosi successiva.

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