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Encyclopedia of Experiments: Biology

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Ensayo isleño: un método de alto rendimiento para evaluar el comportamiento locomotor de Drosophila

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- El ensayo de la isla consiste en una plataforma blanca elevada en una bandeja de agua jabonosa, cubierta por una caja transparente con un lado abierto.

Para cargar las moscas en la arena, toque un vial contra una superficie plana para llevar todas las moscas al fondo. En rápida sucesión, retire el tapón del vial, gire el vial y toque el extremo abierto del vial en la plataforma para derribar todas las moscas al mismo tiempo.

Los sujetos están confinados a la caja, y los que aterrizan en el agua jabonosa se sumerge rápidamente porque el jabón disminuye la tensión superficial del agua.

En este protocolo de ejemplo, veremos una configuración del ensayo isleño compatible con el análisis de imágenes semiautomático.

- En primer lugar, preparar un mínimo de tres viales por condición experimental como réplicas biológicas. Cada vial debe contener aproximadamente 15 moscas del mismo sexo y edad similar.

Cree las carpetas para almacenar los experimentos. Generarlos en una estructura de directorio definida por las condiciones y réplicas. Si, por ejemplo, el experimento tiene dos genotipos con cinco réplicas cada uno, cree una carpeta principal con la fecha del experimento y, dentro de esa carpeta, cree una subcarpeta para cada genotipo.

A continuación, configure el aparato de prueba. Agregue agua fría con una pequeña cantidad de jabón a la bandeja de baño y coloque la plataforma en el centro del baño, si aún no se fija en el baño.

Para iluminar la plataforma, coloque una lámpara fría, como LED ordinarios de 12 voltios, por encima de ella.

En el ordenador, abra el software de grabación de imágenes. En el sistema menu, seleccione la cámara web adecuada como dispositivo de captura.

A continuación, ajuste la configuración de la película de lapso de tiempo para guardar las películas como archivos AVI.

Para la compresión de los datos de imagen, elija el código Intel IYUV. Establezca la velocidad de grabación en un fotograma cada 0,1 segundos y ajuste la velocidad de reproducción correspondiente a 10 imágenes por segundo.

Por último, vaya a la configuración avanzada y seleccione Crear una imagen DE BNP para cada fotograma capturado.

Antes de comenzar, asegúrese de que la isla está vacía y limpia.

Tome un vial que contenga moscas y tóquelo dos o tres veces para derribar todas las moscas hasta el fondo.

a las moscas hasta 30 segundos para salir de la plataforma.

Antes de continuar con el siguiente experimento, asegúrese de redefinir el directorio donde se va a almacenar el siguiente conjunto de datos.

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