Preparación de un modelo de pancreatitis aguda grave en ratones mediante una combinación de caeruleina e inyección intraperitoneal de lipopolisacáridos

La pancreatitis aguda grave se caracteriza por un inicio rápido, una progresión rápida y altas tasas de mortalidad dentro del dominio de la enfermedad del sistema digestivo¹. Su alta tasa de mortalidad siempre ha sido un foco destacado de la investigación clínica. Debido a los cambios impredecibles en las condiciones clínicas, la heterogeneidad de las manifestaciones de la enfermedad y la disponibilidad limitada de muestras humanas, el establecimiento de modelos animales se ha vuelto cada vez más crucial para la investigación de enfermedades.

La inyección retrógrada de taurocolato de sodio en el conducto biliar común se usa comúnmente para crear un modelo de rata de SAP². Al simular la obstrucción pancreáticobiliar e inducir el reflujo de la bilis y el líquido pancreático, esta técnica de modelado exhibe una alta tasa de éxito en la replicación de modelos animales de SAP. Sin embargo, hay que tener en cuenta que la cirugía invasiva sí tiene un impacto en el propio modelo animal. Además, este método se limita a animales más grandes, como ratas y perros, que se utilizan principalmente como sujetos experimentales. Las técnicas alternativas, como la intubación duodenal³, la punción duodenal directa⁴ y la punción directa del conducto biliar-conducto pancreático⁵, se utilizan con frecuencia con fines de modelado.

La inyección intraperitoneal y los métodos de modelado dietético ofrecen ventajas no invasivas que se pueden aplicar a animales de cualquier tamaño. El modelo murino de PAS inducida por la alimentación con deficiencia de colina (CDE)⁶ presenta ciertas complicaciones, como hiperglucemia e hipocalcemia mal controlables, lo que lo hace inadecuado para evaluar nuevos enfoques diagnósticos y terapéuticos. Por otro lado, la inyección intraperitoneal de Caerulein combinada con L-arginina⁷ representa el método más comúnmente empleado para inducir pancreatitis aguda en ratones. En concreto, la administración intraperitoneal repetida de Caeruleína, un análogo de la colecistoquinina, proporciona un enfoque muy adecuado para investigar diversos aspectos relacionados con esta enfermedad destructiva, incluyendo la patogenia, la inflamación y los procesos de regeneración. Debido a su similitud estructural con la colecistoquinina (CCK), la caeruleína estimula eficazmente la contracción de la vesícula biliar y la secreción de enzimas pancreáticas, lo que conduce a un desequilibrio en la secreción de enzimas seguido de la posterior autodestrucción⁸. El lipopolisacárido (LPS), que es ubicuo y se ha estudiado ampliamente como una molécula de patrón molecular asociada a patógenos, puede combinarse con Caerulein mediante inyección intraperitoneal para establecer un modelo eficaz de SAP en ratones. Esta combinación desencadena y libera rápidamente un número significativo de citocinas inflamatorias, lo que resulta en una inflamación local y sistémica excesiva. Varios estudios han reportado la inducción de modelos de SAP en ratones a través de la inyección intraperitoneal de Caerulein combinada con LPS. Esto puede atribuirse al hecho de que la inyección intraperitoneal de Caerulein puede causar edema pancreático y hemorragia en ratones, mientras que la adición de LPS puede inducir inmediatamente necrosis pancreática y exacerbar la respuesta inflamatoria sistémica, sepsis e incluso insuficiencia orgánica. Actualmente, existe variación en la dosis y la frecuencia de las inyecciones intraperitoneales de caeruleína, así como inconsistencia en la dosis adicional de LPS. Lograr la consistencia en los modelos SAP de ratón es un desafío 9,10,11,12; Por lo tanto, es necesario establecer un protocolo estandarizado para obtener un modelo ideal. En este artículo, describimos un protocolo para la inyección intraperitoneal en ratones e investigamos la frecuencia óptima de inyección y la dosis adicional de LPS.