Summary

Modèle modifié de chirurgie de lésion nerveuse épargnée de douleur neuropathique chez la souris

Published: January 25, 2022
doi:

Summary

La chirurgie modifiée est une méthode simplifiée pour le modèle de lésion nerveuse épargnée par la souris ou le rat qui ne nécessite qu’une seule ligature et une incision pour blesser les nerfs péroniers et suraux communs.

Abstract

Les lésions nerveuses épargnées (SNI) sont un modèle animal qui imite les symptômes cardinaux des lésions nerveuses périphériques pour l’étude du mécanisme moléculaire et cellulaire de la douleur neuropathique chez les souris et les rats. À l’heure actuelle, il existe deux types de modèles SNI, l’un pour couper et ligaturer les nerfs péronier commun et tibial avec un nerf sural intact, qui est défini comme SNI dans cette étude, et l’autre pour couper et ligaturer les nerfs péroniers communs et les nerfs suraux avec un nerf tibial intact, qui est défini comme SNIt dans cette étude. Parce que le nerf sural est purement sensoriel alors que le nerf tibial contient à la fois des fibres motrices et sensorielles, le modèle SNIt a beaucoup moins de déficit moteur que le modèle SNI. Dans le modèle murin traditionnel SNIt, les nerfs péronier commun et sural sont coupés et ligaturés séparément. Ici, une méthode chirurgicale SNIt modifiée est décrite pour endommager les nerfs péroniers et suraux communs avec une seule ligature et une coupure avec une durée de procédure plus courte, ce qui est plus facile à réaliser et réduit le risque potentiel d’étirement des nerfs sciatique ou tibial, et produit une hypersensibilité mécanique similaire à celle du modèle SNIt traditionnel.

Introduction

La douleur neuropathique induite par une lésion nerveuse à la suite d’une intervention chirurgicale ou d’un traumatisme a un fardeau économique important qui nuit à la qualité de vie. Une foule de modèles de lésions nerveuses, y compris la ligature du nerf spinal (SNL)1, la lésion de constriction chronique (CCI)2 au nerf sciatique, la ligature partielle du nerf sciatique (pSNL)3, la transaction du nerf sciatique (SNT)4 et les lésions nerveuses épargnées (SNI)5,6,7,8, ont été développés avec succès pour imiter les symptômes cardinaux des lésions nerveuses périphériques chez les rats et les souris afin d’étudier le mécanisme moléculaire et cellulaire de la Douleur neuropathique 6,7,8,9,10. Cependant, chaque modèle chirurgical a ses avantages et ses limites, c’est pourquoi une attention particulière doit être accordée à l’exploration et au développement des modèles chirurgicaux10.

Le modèle SNI de rongeur produit une hypersensibilité à long terme à la stimulation mécanique. Cependant, c’est un peu déroutant car il existe deux modèles SNI différents. Le modèle initial de SNI a été développé dans le laboratoire de Woolf, dans lequel les nerfs péroniers communs et tibiaux ont été blessés, laissant le nerf sural intact 5,6. Le deuxième modèle SNI a été développé dans le laboratoire de Basbaum, dans lequel les nerfs péronier commun et sural ont été blessés, laissant le nerf tibial intact 7,8. Le modèle initial de Woolf est défini ici comme SNIs parce que le nerf sural est laissé intact, et le modèle de Basbaum est défini comme SNIt ici parce que le nerf tibial est laissé intact. Parce que le nerf sural est purement sensoriel alors que le nerf tibial contient à la fois des fibres motrices et sensorielles, le modèle SNIt a beaucoup moins de déficit moteur que le modèle SNI. Cependant, contrairement au modèle SNIs, les souris du modèle SNIt ne développent pas d’hypersensibilité thermique, mais une hypersensibilité mécanique se développe dans les deux modèles. Bien que le modèle SNIt soit une procédure relativement facile, il nécessite la ligature des nerfs sural et péronier commun séparément, avec le risque potentiel d’étirer les nerfs sciatiques ou tibiaux 6,7,8,9.

Les nerfs péroniers, tibiaux et suraux communs sont trois branches du nerf sciatique et peuvent être clairement identifiés sur le bord supérieur du muscle gastrocnémien (Figure 1) : le nerf tibial passe sous le muscle gastrocnémien, et le nerf péronier commun (côté céphalade) et le nerf sural (côté caudal) sont au-dessus du muscle gastrocnémien11. Sur la base de ses caractéristiques anatomiques, une procédure chirurgicale modifiée a été mise au point pour ligaturer les nerfs péroniers et suraux communs avec une seule ligature nerveuse et une seule incision nerveuse, ce qui raccourcit la durée de la procédure.

Protocol

Les expériences sur les animaux ont été approuvées par le comité institutionnel de l’UCSF sur le soin et l’utilisation des animaux et ont été menées conformément au Guide des NIH pour le soin et l’utilisation des animaux de laboratoire. Des souris C57BL/6 adultes pesant de 20 à 30 g ont été utilisées dans cette étude. L’évaluation von Frey a été réalisée entre 13h00 et 15h00. 1. Anesthésie et préparation de la souris…

Representative Results

La comparaison du temps de procédure entre les méthodes modifiées et traditionnelles.Le temps de procédure entre le début de la coupe de la peau et la fin de la fermeture de la peau a été enregistré chez 5 souris avec l’approche modifiée et 5 souris avec l’approche traditionnelle, respectivement. Un nombre minimal d’animaux a été utilisé pour obtenir des résultats statistiquement significatifs. Par rapport au contrôle de l’approche traditionnell…

Discussion

Par rapport à la méthode SNIt traditionnelle de souris qui ligature séparément le nerf péronier commun et le nerf sural 6,7,8,9, le modèle SNIt modifié présente trois avantages : (1) il présente moins de risque de contracter ou d’étirer les nerfs sciatiques ou tibiaux ; (2) Il n’est pas nécessaire d’enlever les moignons du nerf distal après un…

Divulgazioni

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Z.G. est soutenu par NINDS R01NS100801.

Materials

6-0 suture Henry Schein 9007482 Nerve ligation and close the muscular layer
Iris Scissors Integra Miltex 12460598 Cut muscle and fascia
Mayo dissecting scissors Fisherbrand 895120 Cut skin incision
Micro forcep Fisherbrand 16100110 Blunt dissection biceps femoris muscle
Micro Scissors Excelta 17467496 Cut nerve
Microdissection Forceps Fisherbrand 16100123 Separate the common peroneal and the sural nerves from the neighboring tissues
Needle Holder Fisherbrand 8966 Hold 6-0 needle
Prism software Graph Pad version 8.0 Statistical analysis software
Wound clips Roboz Surgical NC1878744 Close skin incision

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Citazione di questo articolo
He, L., Zhao, W., Zhang, L., Ilango, M., Zhao, N., Yang, L., Guan, Z. Modified Spared Nerve Injury Surgery Model of Neuropathic Pain in Mice. J. Vis. Exp. (179), e63362, doi:10.3791/63362 (2022).

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