Valutazione delle risposte ospite-patogeno e l'efficacia del vaccino nei topi

I vaccini rappresentano uno dei più grandi successi di salute pubblica del ventesimo secolo, ma noi ancora non comprendiamo pienamente i meccanismi da cui successo vaccini stimolano l’immunità protettiva. L’identificazione di marcatori molecolari (ad es., gli indicatori di attivazione delle cellule, espansione dei sottotipi cellulari e pattern di espressione genica) indotto dopo vaccinazione offre una pletora di informazioni per la previsione e generando un efficace risposta immunitaria. La complessità delle risposte ospite-patogeno non può essere replicata adeguatamente utilizzando in vitro delle cellule di coltura sistemi¹. In vivo vaccino modelli sono progettati per valutare simultaneamente più tipi di cellule immunitarie all’interno dell’host. Questo fornisce un vantaggio quando che caratterizzano vaccino antigene elaborazione e presentazione, secrezione di citochine differenziale ed espansione delle cellule immuni. Il protocollo descritto qui fornisce un metodo dettagliato per determinare l’efficacia del vaccino attraverso la valutazione delle risposte immunitarie sistemiche e locali e la quantificazione del carico dell’agente patogeno nei tessuti di interesse. L’esempio qui fornito prove dell’efficacia di un vaccino sperimentale per l’agente patogeno Bordetella pertussis (pertosse del b.).

B. pertussis è un batterio gram-negativo che è l’agente eziologico della malattia respiratoria pertosse (pertosse)^2,3. Stretto contatto con persone infette (sintomatiche o asintomatiche) conduce alla trasmissione, la colonizzazione e la malattia. Nonostante vaccino globale significativa copertura⁴, pertosse è considerata una malattia resurging in molte nazioni nel mondo ed è delle principali cause di infanzia evitabili morti^{5,6,7, 8}. nel 2015, b. pertussis e pertosse sono stati inclusi nel Istituto nazionale dell’allergia e delle malattie infettive (NIAID) emergenti elenco agente patogeno/malattia infettiva, sottolineando la necessità per lo sviluppo di un vaccino migliore che conferisce immunità protettiva longevo.

Attualmente, un’area attiva di ricerca per controllare la rinascita di pertosse è lo sviluppo di un vaccino di pertosse acellulare di prossima generazione (aPV) con una combinazione ottimale di nuovi adiuvanti e antigeni per simulare la risposta immunitaria provocata dall’intero-cellula pertosse vaccino (wPV)⁹. Mediante il protocollo descritto, abbiamo recentemente riportato che la modifica di un attuale approvato dalla FDA aPV con l’aggiunta di un romanzo ausiliario, fattore di colonizzazione di Bordetella A (BcfA), ha provocato più efficiente riduzione della carica batterica di b. pertussis da del mouse polmoni^10,11. Questa protezione aumentata è stata accompagnata dall’inclinazione di una risposta di immunitaria Th1/Th2 allume-indotta al più protettivo Th1/Th17 profilo immunitario¹⁰. Questo protocollo è dettagliata e completa, che consente al ricercatore di ottenere informazioni massimale attraverso la valutazione simultanea dell’host e le risposte immunitarie ai vari agenti patogeni.

Il protocollo descritto qui segue la pianificazione di vaccino rappresentativo, illustrata nella Figura 1, affinché le risposte immunitarie ospite ottimale.