Induction of Intestinal Graft - versus - host Disease and son évaluation endoscopique Mini souris vivantes

Malignités hématopoïétiques qui résultent directement du compartiment de cellules souches hématopoïétiques et incontrôlée, progresse rapidement et graves troubles immunitaire sont souvent des indications pour effectuer des allo-HCT^1,2. Cependant, bien que représentant l’apparition de la réponse de graft-versus-tumeur bénéfique pronostique, lymphocytes du donneur sont fréquemment induisant et promouvoir une attaque immunitaire indésirable des composants des tissus sains dans le destinataire allo-HCT , un processus qui est appelé graft – versus – host disease³. Manifestations dans le tube digestif, le soi-disant GVH intestinale, représentent la complication la plus redoutée du greffon contre l’hôte aiguë, des formes sévères qui sont systématiquement associées à une mortalité élevée^1,2,4.

Modèles dans l’ensemble, murins de allo-HCT sont devenus des outils précieux pour identifier et étudier les mécanismes à médiation immunitaire qui sous-tendent la pathogénie du greffon contre l’hôte⁵. Cependant, cinétique évaluation de, par exemple, les effets bénéfiques de nouvelles interventions thérapeutiques au fil du temps chez les souris vivent régulièrement repose sur la détermination du greffon contre l’hôte clinique scores⁶. Alors que ces scores sont adaptés afin de tenir compte, par exemple, la global de morbidité (c’est-à-dire la GvHD systémique), clinique scores manque la sensibilité en miroir avec fiabilité les manifestations spécifiques d’organes (par exemple, dans le tube digestif). Par conséquent, conclusions, par exemple en ce qui concerne les effets de protection intestinale d’une intervention thérapeutique donnée, qui reposent sur ces notation systèmes habituellement tombent à courtes.

Malgré des avancées importantes grâce à l’invention de nouveaux corps modalités en combinaison avec l’utilisation de deux souris génétique bioluminescent ou fluorescent modèles^7,8, directement et spécifiquement des méthodes d’imagerie évaluer l’intestin manifestation du greffon contre l’hôte chez les souris vivantes font défaut. Par conséquent, la raison d’être du protocole de l’évaluation endoscopique du phénotype GVH intestinale décrit dans la section suivante est de surmonter cet obstacle. En outre, la motivation est également de réduire le nombre de souris expérimental puisque, jusqu’à présent, une évaluation détaillée des caractéristiques morphologiques, cellulaires et moléculaires (p. ex., par histopathologie ou en biologie moléculaire) de GVH intestinale manifestation a finalement exigé le sacrifice de la souris de laboratoire.

Notre institution a précédemment rapporté sur la méthodologie d’une évaluation des mini-endoscopique des manifestations du côlon au cours de colite syngénique modèles⁹. Dans le protocole présenté ici, nous avons affiné et adapté le coloscopique marquant la matrice axée sur l’alloresponse ulcéro-hémorragique dans des souris vivantes avec GVH intestinale après transplantation d’alloréactives HCT et donateurs des lymphocytes dans une MHC classe j’ai totalement incompatibles réglage . Nous avons identifié quatre paramètres appropriés pour tenir compte des lésions coliques intestinales axés sur le greffon contre l’hôte. En outre, nous avons établi un système qui permet un classement affiné de n’importe quel déterminant unique, résultant en une nouvelle partition qui facilement informe le lecteur sur la sévérité de la GVH intestinale présente une souris donnée à un moment donné. Les analyses histopathologiques confirment qu’un score endoscopique dépassant un certain seuil est fiable prédire une inflammation des tissus grade modéré à élevé. Il appert donc qu’évaluation endoscopique mini pour représenter un substitut de travail pour l’histopathologie de l’étalon-or qui exige régulièrement le sacrifice des souris expérimentales. Ce qui est important, ce protocole peut être appliqué à pratiquement n’importe quel moment donné et peut être utilisé à plusieurs reprises au cours de la maladie^10,11. En outre, contrairement à l’utilisation d’approches axées sur la bioluminescence, aucune mesure de travail intense et longue comme intercrossing génétiquement des souris modifiées n’est nécessaires et, par conséquent, la méthodologie peut être appliquée sur pratiquement n’importe quelle lignée de souris de intérêt.

Pris ensemble, étant donné le point de vue clinique néfaste des allo-HCT diabétiques GVH intestinale sévère, progrès scientifique rapide et mieux comprendre les mécanismes moléculaires qui sous-tendent la pathogénie immunitaire sont urgent. De même, considérations éthiques importantes exigent que le gain de la connaissance devrait être réalisé avec l’utilisation du nombre minimal des souris de laboratoire. Ainsi, tous les deux reconnu réclamations sur la communauté de recherche explorant la GVH intestinale peuvent être avancées en mettant en œuvre des évaluations endoscopique mini séries du côlon dans la chaîne de travail expérimental pour surveiller et GVH intestinale chez des souris expérimentale direct de grade modèles, tel que décrit et validés dans le protocole présenté ici.