活小鼠肠道移植物对宿主病的诱导及微内窥镜评价

造血恶性肿瘤直接产生的造血干细胞室和不受控制的, 快速进展, 和严重的免疫介导的疾病往往是迹象, 执行全环 hct^1,2。然而, 尽管考虑到预后有益的移植物抗肿瘤反应的发生, 供体淋巴细胞经常诱导和促进不需要的免疫介导的攻击健康组织成分在所有 hct 受者, 一个被称为移植物抗宿主病3的过程^.肠道中的表现, 即所谓的肠道 gvhd, 是急性 gvhd 最可怕的并发症, 其严重的形式通常与高死亡率^1,2,4有关。

总体而言, 小鼠的全聚 hct 模型已成为识别和研究免疫介导^机制的宝贵工具, 其发病机制的 gvhd5。然而, 动态评估, 例如, 随着时间的推移, 新的治疗干预措施的有益效果活小鼠通常是基于临床 gvhd 分数⁶的测定。虽然这些分数适合反映, 例如, 整体疾病负担 (即系统的 gvhd), 临床得分缺乏敏感性, 以可靠地反映器官特定的表现 (例如,在肠道)。因此, 例如关于特定治疗干预措施的肠道保护作用的结论, 以这些评分系统为基础, 通常是不够的。

尽管通过发明新的全身成像模式, 结合生物发光或荧光遗传小鼠模型^7,8的结合, 直接和具体的方法取得了重大进展活鼠肠道 gvhd 的评估缺乏。因此, 下一节描述的肠道 gvhd 表型内窥镜评估协议背后的理由是克服这一障碍。此外, 动机还包括减少实验小鼠的数量, 因为到目前为止, 对肠道 gvhd 的细胞、形态和分子特性 (例如,通过组织病理学或分子生物学) 进行了详细评估显化最终需要实验小鼠的牺牲。

我们的机构以前曾报告过在同一性结肠炎模型^{9 过程中}对结肠表现进行小型内镜评估的方法。在这里介绍的协议中, 我们在 mhc 类的 mhc i 中移植同种异体 hct 和供体淋巴细胞后, 对肠道 gvhd 活小鼠的同种异体引起结肠炎的结肠镜评分矩阵进行了细化和调整.我们确定了四个参数, 适合反映肠道 GvHD-related 相关的结肠病变。此外, 我们还建立了一个系统, 允许对任何单个行列式进行微调分级, 从而产生一个新的分数, 很容易通知读者在给定时间点存在的肠道 gvhd 的严重程度。病理组织学分析证实, 超过一定阈值的内窥镜评分可靠地预测中、高级组织炎症。因此, 迷你内窥镜评估似乎是金标准组织病理学的有效替代品, 通常需要实验小鼠的牺牲。重要的是, 该协议几乎可以在任何特定的时间点应用, 并可在疾病^{发生过程中}反复使用, 10、^11.此外, 与使用与生物照明有关的方法不同的是, 不需要像转基因小鼠交叉这样的劳动密集和耗时的措施, 因此, 该方法几乎可以应用于任何小鼠。兴趣。

综合来看, 鉴于严重肠道 gvhd 患者的临床观点是有害的, 因此迫切需要快速的科学进步和对免疫发病机制背后的分子机制的更深入的了解。同样, 重要的、合乎道德的考虑要求, 应通过使用最少数量的实验小鼠来获得知识。因此, 通过在实验工作链中对结肠进行连续的微内窥镜评估, 对活体实验小鼠的肠道 gvhd 进行监测和分级, 可以提高研究界探索肠道 gvhd 的公认说法。模型, 如本文中提供的协议中所述和验证。