Здесь мы опишем простой и широко доступного технику микроскопии на приобретение высококачественного цифрового видео Drosophila взрослого и личинок мутантных фенотипов с боковой перспективе.
Дрозофилы является мощным экспериментальная модель системы для изучения функции нервной системы. Генные мутации, которые вызывают дисфункцию нервной системы часто производят жизнеспособный личинок и взрослых, которые имеют передвижения, дефектные фенотипы, которые трудно адекватно описать с текстом или полностью представляют с одной фотографического изображения. Текущие режимы научных публикаций, однако, поддерживает представление цифрового видео СМИ как дополнительного материала, чтобы сопровождать рукопись. Здесь мы опишем простой и широко доступного технику микроскопии для получения высококачественного цифрового видео как дрозофилы личинок и взрослых фенотипов с боковой перспективе. Видео из личинок и взрослых передвижения от побочного зрения выгодно, потому что это позволяет наблюдать и анализировать тонких различий и вариаций в аберрантных поведения локомотивных. Мы успешно использовали технику для визуализации и количественной aberranт ползет поведения в третий личинок возрастной стадии, в дополнение к взрослым мутантных фенотипов и поведения в том числе ухода.
Общая плодовой мушки дрозофилы является мощным экспериментальная модель системы для изучения функции нервной системы 1-3. Эволюционная сохранение структуры и функции нервной системы с человека, а также простота генетических манипуляций и огромный массив генетических инструментов делает Drosophila премьерный организм для моделирования человеческого нейродегенеративных заболеваний 4. Генные мутации, вызывающие дисфункции нервной системы часто приводит к жизнеспособным мутант личинок и взрослых дрозофилы с нарушением двигательной. Фенотипы наблюдаемые в нервной системы дефектных мутантов включают снижение темпов передвижения, аномальным координации и спастических движений у взрослых, а также дефицит в перистальтического сокращения стене мускулатуры и частичный паралич личинок. Эти фенотипы были использованы в разработке высокопроизводительных генетических экранов и опорно-двигательного анализов мутантных личинок 5, 6 и 7-10 взрослых дрозофилы направлена на количественное определение нарушения локомоции и идентификации генов, необходимых для функции нервной системы. В то время как эти подходы являются чрезвычайно полезными для количественного личинок и взрослых локомотивных поведения, они не в состоянии передать качественную информацию о каждом конкретном девиантным поведением. Например, в то время как мутант третьего личинки возрастной стадии могут проявлять измененных параметров передвижения, в поведенческой анализа, это может быть непонятно, является ли это результатом изменений в художественной перистальтических сокращений в течение цикла ползать, общее отсутствие координации, или частичным параличом задней тела стена мускулатура. Здесь мы опишем простой и широко доступного технику микроскопии для получения высококачественного цифрового видео Drosophila взрослого и личинок фенотипов локомотивных от боковой перспективе. Цифровое видео приобрела у боковой перспективе позволяет прямое наблюдение и анализ тонких различий в Локомотиве поведения от более информативное ориентации бокового обзора.
Сила Дрозофилы 'ы в качестве модельной системы для изучения функции нервной системы значительной мере обусловлено сходимости мощных генетических инструментов доступных и широкого круга надежных поведенческих анализов развитой. Здесь мы представляем простой и широко доступн?…
The authors have nothing to disclose.
Авторы хотели бы выразить признательность Александру Опи для технической помощи и поддержки, Джеймс Бартон за предоставление видео повествование, и Рамона Flatz и Joellen Суини за появление в сопроводительном видео. Эта работа была поддержана MJ Мердок Благотворительный фонд (грант № 2012205 на JED).
Trinocular Stereozoom Microscope | Olympus Corporation | SZ6145TR | ½ C-mount was removed and replaced with 1x C-mount |
1X C-mount | Leeds Precision Instruments | LSZ-1XCMT2 | |
Digital Camera Coupler (43mm thread) | Qioptiq Imaging Solutions | 25-70-10-02 | |
58mm to 48mm Step Down Ring | B&H Video | GBSDR5848 | |
48mm to 43mm Step Down Ring | B&H Video | GBSDR4843 | |
Lensmate Adapter Kit for Canon G10 | LensMateOnline.com | ||
Canon PowerShot G10 Digital Camera | Canon U.S.A., Inc. | ||
1.5ml Spectroscopic PolystereneCuvette | Denville Scientific | U8650-4 |