ここでは、SCが伸びる軸索に沿って開発することができますているシュワン細胞(SC)の遊走アッセイを記述します。
末梢神経の開発は魅力的なプロセスです。ニューロンはヒトで100以上の30cm離れニューロンの細胞体からしばしば具体的な目標を、支配する軸索を送る。開発中の神経細胞の生存は、対象由来成長因子でなく、シュワン細胞(SCS)のサポートに依存します。この目的を達成するために神経細胞体の地域(または中枢から末梢神経系への移行)のSC ensheath軸索シナプスや神経筋接合部へ。シュワン細胞は神経堤の誘導体であり、全体の軸索は、SCSで覆われるまで、新興の軸索に沿って前駆体として移行されます。これは、末梢神経系の開発のためのSCの移行の重要性を示しており、このプロセスを調査する必要性を強調している。 SCの発展を分析するために、設定も移行のためのそれらの生理学的基質、軸索を含むSCの隣に必要とされる。子宮内の開発による<emは>生体タイムラプスイメージングでは、しかし、マウス( ハツカネズミ )のような胎盤の脊椎動物には不可能である。これを回避するために、我々は上頸神経節(SCG)植技術を適応した。神経成長因子(NGF)を用いた治療に基づいたSCG外植片は神経節から周囲に軸索に沿って移行SCの前駆続いて軸索を伸ばす。このシステムの利点は、SCが内因性SCのプールから、それらが同時に成長している自分自身の生理的な軸索に沿って移行することに由来していることです。軸索に沿ってSCの開発がSCの移行についての洞察を得るために更なる可能性を開いて、タイムラプスイメージングによって解析することができるので、このシステムは、特に興味をそそられる。
末梢神経系の発達は、エキサイティングなプロセスです。開発が完了すると、軸索は、ヒトでは、多くの場合100 cm以上であることができます全体の長さに沿って、SCSによってensheathedされています。この目的を達成するために必要なSCの正しい数はまた、完全な軸索のカバレッジを確保するため、周囲に伸びる軸索に沿って移動しなければならない開発およびSCの間に確立されてきました。こ?…
The authors have nothing to disclose.
私たちは、優れた技術支援のためにコラーゲンプロトコルとユッタ·フェイとウルスラヒンツを共有するためのUrmas Arumaeに感謝したいと思います。さらに我々は親切にビデオshotingのヘルプのためにクリスチャン·F·アッカーマン、ウルリケ·エンゲルとハイデルベルク大学のニコンイメージングセンターともヨアヒムキルシュに感謝したいと思います。研究の一部はドイツ学術振興(SFB 592)を通じて資金を供給された。
Name of Reagent/Material | Company | Catalogue Number | Comments |
10x MEM | Gibco | 21430 | |
Sodium Bicarbonate (7.5%) | Gibco | 25080 | |
Glutamine | Gibco | 25030 | |
NaOH | Merck | 109137 | |
NGF | Roche | 1058231 | R&D#556-NG-100 |
Neurobasal Medium | Gibco | 21103 | |
B27 Supplement | Gibco | 17504 | |
antibiotics | Gibco | 15640 | |
d-PBS | Gibco | 14040 | |
insect needles | FST | 26002-20 | |
syringe needle | Braun | BD # 300013 | |
8 well chamber slide | Lab tek | 177402 |