कोशिकी सक्शन इलेक्ट्रोड निर्माण: स्पाइनल कॉर्ड इलैक्ट्रोफिजियोलॉजी द्वितीय
Summary
निर्माण और एक कोशिकी चूषण नवजात कृंतक रीढ़ की हड्डी डोरियों के electrophysiological रिकॉर्डिंग को मापने के लिए इस्तेमाल किया इलेक्ट्रोड के उपयोग का एक प्रदर्शन<em> इन विट्रो में</em
Abstract
तंत्रिका circuitries और हरकत के विकास नवजात कृंतक रीढ़ की हड्डी में केंद्रीय पैटर्न जनरेटर व्यवहार (CPG) का उपयोग कर अध्ययन किया जा सकता है. हम dissected कृंतक रीढ़ की हड्डी डोरियों में एक चूषण इलेक्ट्रोड है कि CPG गतिविधि की जांच करने के लिए उपयोग किया जाता है, या कल्पित हरकत बनाना विधि प्रदर्शित करता है. कृंतक स्पाइनल तार कृत्रिम मस्तिष्कमेरु द्रव में रखा जाता है और उदर जड़ों चूषण इलेक्ट्रोड में तैयार कर रहे हैं. इलेक्ट्रोड एक व्यावसायिक रूप से उपलब्ध चूषण इलेक्ट्रोड को संशोधित से निर्माण किया है. भारी चांदी के तार व्यावसायिक रूप से उपलब्ध इलेक्ट्रोड के द्वारा दिए गए मानक तार के बजाय प्रयोग किया जाता है. वाणिज्यिक इलेक्ट्रोड पर कांच टिप बढ़ स्थायित्व के लिए एक प्लास्टिक की टिप के साथ बदल दिया है. हम हाथ खींचा इलेक्ट्रोड और टयूबिंग के विशिष्ट आकार से बनाया इलेक्ट्रोड की तैयारी कर रहे हैं, स्थिरता और reproducibility की अनुमति. डेटा एक एम्पलीफायर और neurogram अधिग्रहण सॉफ्टवेयर का उपयोग करने के लिए एकत्र की है. रिकॉर्डिंग एक हवा की मेज पर एक फैराडे पिंजरे के भीतर प्रदर्शन कर रहे हैं यांत्रिक और बिजली के हस्तक्षेप को रोकने के लिए, क्रमशः.
Protocol
Discussion
तंत्रिका तंत्र के विकास पृथक कृंतक स्पाइनल तार का उपयोग कर अध्ययन किया जा सकता है. न्यूरोट्रांसमीटर की उपस्थिति में, कल्पित हरकत नमूनों बिजली 1,3 गतिविधि के रूप में रीढ़ की हड्डी से उत्पन्न किया जा ?…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
शमूएल एल Pfaff जीन एक्सप्रेशन प्रयोगशालाओं में जैविक अध्ययन के लिए सॉल्क संस्थान में एक प्रोफेसर और हॉवर्ड ह्यूजेस मेडिकल इंस्टीट्यूट में एक अन्वेषक है. यह काम क्रिस्टोफर और दाना रीव फाउंडेशन द्वारा समर्थित किया गया था. जो Belcovson, केंट Schnoeker और सॉल्क संस्थान में मल्टीमीडिया संसाधन में माइक सुलिवान फोटोग्राफी और संपादन के साथ सहायता प्रदान की है.
Materials
| Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| PTFE Sub Lite Wall Tubing (Small tubing) | Zeus | 36AWG | 0.005”ID x 0.003” Wall (Small Parts) Also available in 0.003” to 0.006” | |
| Large tubing (0.86mm (0.34”)) | Clay Adams Brand Intramedic Becton Dickinson and Company | 427420 | 0.86mm (0.34”) O.D. 1.27mm (.050”) | |
| Electrode Barrel | A-M Systems | 573000 | ||
| Adhesive | JB Weld | |||
| Adhesive: Silicone caulk | ||||
| Solder and soldering iron | ||||
| Bleach | ||||
| Xylene | ||||
| Silver wire: 0.010” | A-M Systems | |||
| Insect pins: Austerlitz 0.1mm | Fine Science Tools | 26002-10 | ||
| Magnetic Stand | Narishige | GJ-8 | ||
| Micromanipulator | Narishige | MN 151 | ||
| Miniboard (Headstage) | Grass Industries | F-15EB/B1 | ||
| Polyview Adaptor Unit | Grass Industries | PVA 8 | ||
| Bipolar Portable Physiodata Amplifier System | Grass Industries | 15LT | ||
| ANALOG TO DIGITAL CARD | National Instruments | 6035E | ||
| Air Table; Vibraplane | Kinetic Systems |
Riferimenti
- Gallarda, B. W., Sharpee, T. O., Pfaff, S. L., Alaynick, W. A. Defining rhythmic locomotor burst patterns using a continuous wavelet transform. Ann N Y Acad Sci. 1198, 133-139 (2010).
- Meyer, A., Gallarda, B. W., Pfaff, S., Alaynick, W. Spinal cord electrophysiology. J Vis Exp. , (2010).
- Gallarda, B. W. Segregation of axial motor and sensory pathways via heterotypic trans-axonal signaling. Science. 320, 233-236 (2008).
- Landmesser, L. The development of motor projection patterns in the chick hind limb. J Physiol. 284, 391-414 (1978).
- Myers, C. P. Cholinergic input is required during embryonic development to mediate proper assembly of spinal locomotor circuits. Neuron. 46, 37-49 (2005).
- Chanin, M. The determination of chloride by use of the silver-silver chloride electrode. Science. 119, 323-324 (1954).
- Goulding, M. Circuits controlling vertebrate locomotion: moving in a new direction. Nat Rev Neurosci. 10, 507-518 (2009).
