Децеллюляризация молочных жировых колодок: вывод внеклеточных матричных гидрогелей из молочных жировых колодок
Published: April 30, 2023
Abstract
Источник: Алвес и др., Изучение нормальных эффектов излучения тканей с использованием внеклеточной матрицы Гидрогели. J. Vis. Exp. (2019).
Это видео описывает метод получения внеклеточных матричных гидрогелей путем децеллюляризации мурин молочных жировых подушечек после облучения ex vivo для исследований in vitro. Этот гидрогель помогает имитировать in vivo ткани молочной железы окружающей среды после лучевой терапии для изучения поведения опухолевых клеток.
Protocol
1. Децеллюляризация ПРИМЕЧАНИЕ: Эта процедура была адаптирована из ранее опубликованных методов, ориентированных на жировой децеллюляризации, которая включала деоксихолат натрия ионных моющих средств, а не додецил сульфат натрия для эффективного удаления ?…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Materials
| 10% Neutral Buffered Formalin, Cube with Spigot | VWR | 16004-128 | |
| 2-methylbutane | Alfa Aesar | 19387 | |
| Bovine Serum Albumin | Sigma-Aldrich | A1933-25G | |
| Dulbecco's phosphate-buffered saline | Gibco | 14040133 | |
| Fisher Healthcare Tissue-Plus O.C.T. Compound | Fisher Scientific | 23-730-571 | cryostat embedding medium |
| Kimtech Science Kimwipes | Kimberly Clark | delicate task wipes | |
| n-Propanol (Peroxide-Free/ Sequencing), Fisher BioReagents | Fisher Scientific | BP1130-500 | |
| PBS (10X), pH 7.4 | Quality Biological, Inc. | 119-069-151 | Phosphate-buffered saline |
| Penicillin-Streptomycin | Gibco | 15140-122 | |
| Peracetic acid | Sigma-Aldrich | 77240-100ML | |
| Triton x-100 | Sigma-Aldrich | X100-100ML | t-Octylphenoxypolyethoxyethanol |
| Trypsin-EDTA (0.25%), phenol red | Gibco | 25200-056 | |
| Richard-Allan Scientific Signature Series Hematoxylin 7211 | Richard-Allan Scientific | 7211 | |
| Whatman qualitative filter paper, Grade 4 | Whatman | 1004-110 | grade 4 qualitative filter paper |
| Xylenes (Certified ACS), Fisher Chemical | Fisher Scientific | X5-5 |
Citazione di questo articolo
Decellularizing Mammary Fat Pads: Deriving Extracellular Matrix Hydrogels from Mammary Fat Pads. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20229, doi: (2023).