脱細胞化乳脂肪パッド:乳腺脂肪パッドから細胞外マトリックスヒドロゲルを導出する
Published: April 30, 2023
Abstract
出典:アウベスら、細胞外マトリックスハイドロゲルを用いた正常組織放射線影響の研究。J.Vis. Exp. (2019).
このビデオでは、インビトロ研究のためのex vivo照射に続いて、マウスママリ脂肪パッドを脱細胞化することによって細胞外マトリックスヒドロゲルを導出する技術について説明します。このヒドロゲルは、腫瘍細胞の挙動を研究するために放射線治療後の生体内乳房組織環境を模倣するのに役立ちます。
Protocol
1. 脱細胞化 注: この手順は、DNAを効率的に除去するためにドデシル硫酸ナトリウムではなくデオキシコール酸イオン性洗剤を含む脂肪脱細胞化に焦点を当てた以前に発表された方法から適応された。 1日目には、凍結した乳脂肪パッドまたはMMPを-80°Cから取り出し、室温で解凍します。 解凍したら、繊細なタスクワイプでMMP?…
Divulgazioni
The authors have nothing to disclose.
Materials
| 10% Neutral Buffered Formalin, Cube with Spigot | VWR | 16004-128 | |
| 2-methylbutane | Alfa Aesar | 19387 | |
| Bovine Serum Albumin | Sigma-Aldrich | A1933-25G | |
| Dulbecco's phosphate-buffered saline | Gibco | 14040133 | |
| Fisher Healthcare Tissue-Plus O.C.T. Compound | Fisher Scientific | 23-730-571 | cryostat embedding medium |
| Kimtech Science Kimwipes | Kimberly Clark | delicate task wipes | |
| n-Propanol (Peroxide-Free/ Sequencing), Fisher BioReagents | Fisher Scientific | BP1130-500 | |
| PBS (10X), pH 7.4 | Quality Biological, Inc. | 119-069-151 | Phosphate-buffered saline |
| Penicillin-Streptomycin | Gibco | 15140-122 | |
| Peracetic acid | Sigma-Aldrich | 77240-100ML | |
| Triton x-100 | Sigma-Aldrich | X100-100ML | t-Octylphenoxypolyethoxyethanol |
| Trypsin-EDTA (0.25%), phenol red | Gibco | 25200-056 | |
| Richard-Allan Scientific Signature Series Hematoxylin 7211 | Richard-Allan Scientific | 7211 | |
| Whatman qualitative filter paper, Grade 4 | Whatman | 1004-110 | grade 4 qualitative filter paper |
| Xylenes (Certified ACS), Fisher Chemical | Fisher Scientific | X5-5 |
Citazione di questo articolo
Decellularizing Mammary Fat Pads: Deriving Extracellular Matrix Hydrogels from Mammary Fat Pads. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20229, doi: (2023).