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Schnelle In-vivo-Fixierung und Isolierung translationaler Komplexe aus eukaryotischen Zellen
Journal JoVE
Biologie
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Journal JoVE Biologie
Rapid In Vivo Fixation and Isolation of Translational Complexes from Eukaryotic Cells
DOI:

14:29 min

December 25, 2021

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Chapitres

  • 00:10Introduction
  • 01:06Yeast Cell Culture and FIxation
  • 03:58Yeast Cell Disruption and Cytosol Collection
  • 05:45Mammalian Cell Culture and Fixation
  • 09:40Mammalian Cell Disruption and Cytosol Collection
  • 11:02Résultats
  • 13:41Conclusion

Summary

Traduction automatique

Wir stellen eine Technik zur schnellen Stabilisierung translationaler (Proteinbiosynthese) Komplexe mit Formaldehydvernetzung in lebenden Hefe- und Säugetierzellen vor. Der Ansatz ermöglicht die Sezierung transienter Zwischenprodukte und dynamischer RNA:Protein-Interaktionen. Die vernetzten Komplexe können in mehreren nachgelagerten Anwendungen eingesetzt werden, z. B. in Deep-Sequencing-basierten Profilierungsmethoden, Mikroskopie und Massenspektrometrie.

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