Ici, l’application de l’interférence CRISPR (CRISPRi) pour le silençage génétique spécifique chez les espèces de Leptospira est décrite. Les cellules de Leptospira sont transformées par conjugaison avec des plasmides exprimant dCas9 (Catalytiquement « mort » Cas9) et un ARN monoguide (SGRNA), responsable de l’appariement de base à la cible génomique souhaitée. Des méthodes pour valider le silençage génique sont présentées.
Fernandes, L. G. V., Hornsby, R. L., Nascimento, A., Nally, J. E. Application of CRISPR Interference (CRISPRi) for Gene Silencing in Pathogenic Species of Leptospira. J. Vis. Exp. (174), e62631, doi:10.3791/62631 (2021).